人膀胱移行细胞癌细胞带荧光素酶；T24/LUC (STR)

                                                           人膀胱移行细胞癌细胞带荧光素酶；T24/LUC (STR)
产品信息：

T24/LUC (STR) 细胞是一种经过荧光素酶（Luciferase）基因转染的人膀胱移行细胞癌细胞系，常用于肿瘤生物学研究，特别是体内成像和肿瘤生长监测。以下是其详细说明、培养操作及特性：

细胞背景

来源：T24细胞源自人膀胱移行细胞癌，LUC表示该细胞系经过荧光素酶基因转染，可用于生物发光成像（BLI）。

应用：常用于膀胱癌的生长、转移及治疗反应的体内研究，通过荧光素酶报告基因实现实时监测

2. 细胞特性

形态：上皮样细胞，贴壁生长。

生长特性：倍增时间约为19小时，需在适宜条件下维持指数生长。

荧光素酶表达：可在加入底物D-荧光素后发出生物荧光，便于活体成像。

3. 培养操作

培养基

推荐使用含10%胎牛血清（FBS）、1%抗生素（如青霉素/链霉素）的MCCO'S 5A培养基。

培养条件

温度：37℃。

气体环境：5% CO、95%空气的湿润培养箱。

传代步骤

观察细胞：当细胞汇合度达到80%-90%时进行传代。

移除旧培养基：轻轻吸出旧培养基，用PBS清洗细胞一次。

消化细胞：加入适量胰酶-EDTA溶液，37℃孵育至细胞脱落（通常1-2分钟）。

终止消化：加入含血清的培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞悬浮。

分装细胞：将细胞悬液按适当比例分装到新培养瓶中，补加新鲜培养基。

继续培养：置于培养箱中继续培养，定期观察细胞状态。

冻存与复苏

冻存：使用含10% DMSO和90% FBS的冻存液，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮罐或-80℃冰箱。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中融化，随后转移至含预热培养基的培养瓶中，轻轻混匀后放入培养箱。

4. 注意事项

无菌操作：全程需在超净工作台中进行，避免污染。

定期检测：建议定期进行支原体检测和STR鉴定，确保细胞系的纯度和身份。

荧光素酶检测：进行生物发光成像前，需加入适量D-荧光素底物，并在避光条件下进行检测。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。