人黑色素瘤细胞株带荧光素酶；A375/LUC (STR)

产品信息：

人黑色素瘤细胞株带荧光素酶；A375/LUC (STR) 是一种经过基因改造的黑色素瘤细胞系，携带荧光素酶（Luc）基因，能够通过生物发光反应进行活体成像和定量分析。以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

细胞系名称：A375/LUC

组织来源：黑色素瘤

物种来源：人源

形态特征：上皮细胞样，贴壁生长

特殊标记：携带荧光素酶（Luc）基因，可在添加荧光素底物后发出生物荧光，适用于活体成像和定量分析

STR鉴定：经STR鉴定，确保细胞系遗传稳定性与身份准确性

2. 培养条件与操作

培养基：推荐使用DMEM培养基，补充10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：

温度：37℃

气相：95%空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

传代操作：

传代比例：1:2至1:4，每2-3天传代一次。

消化方法：使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落时及时终止消化。

冻存与复苏：

冻存液：90% FBS + 10% DMSO，液氮保存。

复苏方法：将冻存管从液氮中取出，迅速置于37℃水浴中解冻，转移至含新鲜培养基的离心管中，离心后重悬细胞并接种至培养瓶。

3. 应用

肿瘤研究：研究黑色素瘤的生物学特性、转移机制和信号通路。

药物筛选：用于评估抗癌药物的疗效和机制。

活体成像：利用荧光素酶标记，实时监测肿瘤生长、转移及治疗反应，提供高灵敏度的无创检测手段。

4. 注意事项

细胞状态监控：定期观察细胞形态和生长密度，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

污染防控：严格遵守无菌操作规范，定期检测支原体污染，必要时使用抗生素预防细菌污染。

荧光素酶活性维持：确保细胞健康状态以维持荧光素酶活性，避免长时间传代导致基因表达下降。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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