人骨肉瘤细胞带红色荧光；143B/RFP (STR) 新品

                                                           人骨肉瘤细胞带红色荧光；143B/RFP (STR)
产品信息：

143B/RFP 是一种稳定表达红色荧光蛋白（RFP）的人骨肉瘤细胞系，源自原始 143B 细胞系（人骨肉瘤细胞），通过基因工程改造使其表达红色荧光蛋白（如 tdTomato 或 mCherry 等），便于在显微镜下或活体成像中追踪和观察细胞行为12

以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞概述

来源：143B/RFP 细胞系来源于人骨肉瘤组织，属于恶性肿瘤细胞系，常用于骨肉瘤的研究。

形态：上皮细胞样或成纤维细胞样，贴壁生长。

特性：该细胞系稳定表达红色荧光蛋白（RFP），便于在显微镜下或活体成像中追踪和观察细胞行为。

2. 培养条件

培养基：推荐使用 DMEM 培养基，添加 10%-20% 胎牛血清（FBS）和 1% 双抗（青霉素和链霉素）。

培养环境：37°C，5% CO，湿度保持在 70%-80%。

传代比例：通常采用 1:2 至 1:3 的比例进行传代，当细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

3. 细胞操作

3.1. 复苏

从液氮中取出冻存管，迅速放入 37°C 水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含有完全培养基的离心管中，离心后弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，放入培养箱中培养。

3.2. 传代

当细胞密度达到 80%-90% 时，弃去旧培养基，用 PBS 润洗细胞。

加入胰蛋白酶消化细胞，显微镜下观察细胞变圆后，加入完全培养基终止消化。

离心后重悬细胞，按适当比例分瓶培养。

3.3. 冻存

细胞密度达到 80%-90% 时，用胰蛋白酶消化细胞。

离心后弃去上清液，用无血清冻存液（如 90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞。

分装至冻存管中，逐步降温后放入液氮中保存。

4. 细胞特性

生长特性：143B/RFP 细胞生长速度较快，贴壁生长，形态呈上皮细胞样或成纤维细胞样。

荧光特性：稳定表达红色荧光蛋白（RFP），便于在显微镜下或活体成像中追踪和观察细胞行为。

应用领域：广泛应用于骨肉瘤的研究，包括肿瘤发生机制、药物筛选、信号转导途径研究以及潜在治疗策略的开发。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。