人胚肺成纤维细胞；HELF (STR)

产品信息：

人胚肺成纤维细胞（HELF）是一种源自人类胚胎肺组织的细胞系，常用于细胞生物学、毒理学和药物筛选等研究领域。以下是关于HELF细胞的详细说明、培养操作及特性：

来源：人类胚胎肺组织。

形态：贴壁生长。

生长特性：生长缓慢，具有有限的传代次数，通常在培养条件下可传代30-50次

STR鉴定：通过STR分析确认细胞身份，避免交叉污染或误认。

2. 培养条件

培养基：通常使用高糖DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：37°C、5% CO、饱和湿度培养箱。

换液频率：每2-3天换液一次，或根据细胞密度和培养基颜色变化及时更换。

3. 培养操作

3.1. 细胞复苏

从液氮中取出冻存管，迅速放入37°C水浴中，轻轻摇晃至完全解冻。

将细胞悬液转移至含有5-6 mL预热培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

加入4-6 mL新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，置于培养箱中培养过夜。

第二天观察细胞状态，待细胞贴壁后换液。

3.2. 细胞传代

当细胞密度达到80%-90%时，弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入1 mL胰酶（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），37°C消化1-3分钟，显微镜下观察细胞脱落情况。

加入2-3 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞形成单细胞悬液。

1000 rpm离心5分钟，弃去上清，加入新鲜培养基重悬细胞。

按1:2至1:4的比例将细胞悬液分至新的培养瓶中，继续培养。

3.3. 细胞冻存

收集对数生长期的细胞，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

用PBS洗涤细胞一次，再次离心后弃去上清。

加入冻存液（90% FBS + 10% DMSO），轻轻混匀细胞悬液。

将细胞分装至冻存管中，标记好信息，放入程序降温盒中，转移至-80°C冰箱过夜。

第二天将冻存管转入液氮罐中长期保存。

4. 注意事项

无菌操作：所有操作需在超净工作台中进行，避免细胞污染。

细胞观察：定期在显微镜下观察细胞形态和生长状态，记录细胞密度和健康状况。

培养基更换：根据细胞生长情况及时更换培养基，避免营养耗尽或代谢废物积累影响细胞生长。

冻存与复苏：冻存细胞时注意降温速度，复苏时快速解冻以提高细胞存活率。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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