人口腔鳞状细胞；WSU-HN30 (STR)

                                                           人口腔鳞状细胞；WSU-HN30 (STR)
产品信息：

WSU-HN30是一种人口腔鳞状细胞癌细胞系，常用于口腔癌研究。以下是其详细说明、培养操作和特性：

1. 细胞概述

来源：WSU-HN30细胞系来源于一名男性口腔鳞状细胞癌患者。

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

特性：该细胞系具有鳞状细胞癌的典型特征，常用于研究口腔癌的分子机制、药物筛选和癌症免疫治疗。

培养条件

培养基：推荐使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素和链霉素）。

培养环境：37°C，5% CO，湿度保持在70%-80%。

传代比例：通常采用1:2至1:3的比例进行传代，当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

3. 细胞操作

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速放入37°C水浴中解冻。将细胞悬液转移至含有完全培养基的离心管中，离心后弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，放入培养箱中培养。

传代：弃去旧培养基，用PBS润洗细胞。加入胰蛋白酶消化细胞，显微镜下观察细胞变圆后，加入完全培养基终止消化。离心后重悬细胞，按适当比例分瓶培养。

冻存：细胞密度达到80%-90%时，用胰蛋白酶消化细胞。离心后弃去上清液，用无血清冻存液重悬细胞，分装至冻存管中，逐步降温后放入液氮中保存。

4. 细胞特性

生长特性：WSU-HN30细胞生长较快，贴壁生长，形态呈上皮细胞样。

分子特征：该细胞系常表现出TP53突变和EGFR高表达，这些特征使其成为研究口腔鳞状细胞癌分子机制和药物反应的理想模型。

应用领域：广泛应用于口腔癌研究，包括肿瘤发生、转移、免疫逃逸机制的研究，以及抗癌药物筛选和基因治疗研究。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。