人胚肾细胞；293T/17 (STR)

                                                           人胚肾细胞；293T/17 (STR)
产品信息：

293T/17细胞是一种广泛使用的人胚肾细胞系，常用于分子生物学和生物医学研究，特别是在基因表达、病毒包装和蛋白质生产等领域。以下是关于293T/17细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

种属与组织来源：人源，胚胎肾组织。

形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长。

遗传特征：293T/17细胞是293T细胞的衍生株，293T细胞是HEK-293细胞插入SV40大T抗原温度敏感基因后形成的高转染效率细胞系。

持续表达SV40大T抗原，支持外源基因高效表达。

应用领域：常用于逆转录病毒包装、基因表达研究、蛋白质生产和RNA干扰实验等。

生物安全等级：1级。

培养条件与操作

培养基：DMEM培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%青霉素-链霉素（P/S）。

复苏：

冻存管37℃水浴快速解冻，加入5mL预热完全培养基混匀1。

1000rpm离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬细胞。

接种至T25培养瓶，补充6-8mL培养基，37℃培养过夜。

传代：

细胞密度达80%-90%时进行传代。

弃旧培养基，PBS润洗1-2次，加入1-2mL 0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟（镜下观察细胞变圆脱落）。

加完全培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液。

离心收集细胞后按1:2至1:4比例分瓶，补充新鲜培养基继续培养[。

冻存：

细胞生长良好时收集，离心后弃上清。

用无血清冻存液（或90%FBS+10%DMSO）重悬细胞，调整密度至1×10⁶/mL以上。

分装冻存管，使用程序降温盒逐步降温（先置于-20℃1.5小时，再转入-80℃冰箱），24小时后可转入液氮罐长期保存。

注意事项

无菌操作：全程严格无菌操作，避免污染。

细胞状态监控：定期在显微镜下观察细胞形态和密度，及时换液和传代。

运输与保存：细胞运输过程中注意温度控制，收到细胞后尽快复苏培养，避免长时间放置。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。