THLE-2人肝永生化细胞 新品

                                                            THLE-2人肝永生化细胞
产品信息：

THLE-2人肝永生化细胞是一种来源于正常人肝组织的上皮细胞样细胞系，通过SV40大T抗原感染实现永生化，广泛应用于肝功能、药物代谢和毒理学研究。以下是其详细介绍和培养操作：

细胞特性：

种属与来源：人正常肝组织（左叶）

形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长

永生化方式：SV40大T抗原感染

特性：无致瘤性，表达正常成人肝上皮细胞相关基因，参与化学致癌物代谢

培养条件：

培养基：BEGM培养基（需添加EGF、磷酸乙醇胺、FBS等）

气体环境：95%空气 + 5% CO₂

温度：37℃

湿度：70%-80%

培养操作：

复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速在37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含5 mL完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟。

弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，加入8 mL完全培养基，置于培养箱中过夜。

传代：

当细胞密度达80%-90%时进行传代。

弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次。

加入消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA），37℃消化1-2分钟，镜下观察细胞变圆并脱落。

加入完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使其完全脱落。

1000 rpm离心8-10分钟，弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞。

按1:2至1:6的比例将细胞悬液分到新的培养瓶中，加入新鲜培养基。

冻存：

在细胞状态良好时，弃去培养基，用PBS清洗细胞。

加入胰酶消化细胞，待细胞脱落后加入完全培养基终止消化。

1000 rpm离心5分钟，弃去上清，用冻存液（90%完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。

将细胞悬液分装至冻存管中，逐步降温至-80℃，最后移入液氮中保存。

培养条件与操作

培养基及环境：

基础培养基：DMEM高糖培养基补充10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（P/S）。

培养环境：37°C、5% CO?、湿度70%-80%的培养箱。

传代培养（细胞密度达80%-90%时）：

消化：弃培养液，PBS轻洗后加入0.25%胰酶（含EDTA），37°C消化1-3分钟（显微镜下观察细胞变圆、间隙增大即终止）。

终止与重悬：加入完全培养基终止消化，轻柔吹打成单细胞悬液，1000rpm离心3-5分钟，弃上清后重悬于新培养基。

分瓶比例：推荐1:2至1:4（具体视细胞生长速度调整），接种至新T25瓶并补足培养基。

冻存操作：

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（或无血清冻存液）。

程序：细胞沉淀重悬于冻存液，分装至冻存管后放入-80°C过夜，次日转入液氮保存。

复苏方法：

37°C水浴快速解冻，转移至含预热培养基的离心管，100 0rpm离心3-5分钟，重悬后接种于新培养瓶。

细胞的功能特性

细胞具备多种基本功能：

物质运输：通过被动运输（自由扩散、协助扩散）和主动运输实现物质跨膜转运

能量转换：以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能

信息传递：通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导

增殖分裂：原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖

分化与死亡：细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

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