亨德拉病毒(HeV)检测试剂盒(荧光PCR法)

商品属性：

亨德拉病毒(HeV)检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种用于快速、灵敏检测亨德拉病毒核酸的分子诊断工具，广泛应用于临床诊断、流行病学调查及生物安全监测。

检测原理

试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对亨德拉病毒基因组的保守区域（如核衣壳蛋白基因N或RNA聚合酶基因L）设计特异性引物和荧光探针，通过实时监测PCR扩增过程中的荧光信号，实现对病毒核酸的定性检测。

产品组成

PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg2?等PCR反应必需成分。

酶混合液：含高保真DNA聚合酶、逆转录酶等。

特异性引物和探针：针对HeV保守基因区域设计，探针标记荧光报告基团（如FAM）和淬灭基团。

阳性对照：含已知浓度的HeV核酸，用于验证试剂盒有效性。

阴性对照：不含目标基因，用于排除假阳性。

操作步骤

样品采集与处理：采集呼吸道样本（如鼻咽拭子、咽拭子）、血液或组织样本，提取总RNA。

试剂配制：配制PCR反应混合液，包含反应液、酶液、引物和探针。

加样：将提取的核酸、阳性对照和阴性对照加入反应管中。

PCR扩增：设置扩增程序（如50℃逆转录30分钟，95℃预变性5分钟，随后进行40个循环的变性、退火和延伸），实时监测荧光信号。

结果分析：根据Ct值判断结果，阳性对照应有典型S型扩增曲线，阴性对照应无扩增曲线。

操作特点

高灵敏度和特异性：最低检出限达100-500拷贝/mL，特异性≥99%，可有效区分HeV与其他副黏病毒科病毒。

快速检测：全程检测时间1-2小时（含核酸提取），较传统病毒分离培养法（24-48小时）效率显著提升。

操作简便：试剂盒提供预混试剂，反应体系配置简单，支持批量样本处理，可搭配全自动核酸提取仪。

防污染设计：采用防污染技术（如尿素、Betaine等添加剂），降低扩增产物污染风险，提高实验可靠性。

注意事项

严格分区操作：为避免交叉污染，应将实验分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区。

防污染措施：所有操作需戴一次性手套，使用带滤芯吸头，实验结束后用10%次氯酸或75%酒精处理工作台。

试剂保存：试剂盒组分应按照说明书要求保存，通常需要避光、低温保存，避免反复冻融。

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