霍乱弧菌 O1/O139 群检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) 新品

商品属性：

霍乱弧菌O1/O139群检测试剂盒(双重荧光PCR法)是一种用于同时检测霍乱弧菌O1群和O139群的分子生物学试剂盒。以下是其详解说明及操作特点：

检测原理：基于实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光探针，针对霍乱弧菌O1群和O139群的特异性基因片段（如rfb基因簇）进行扩增和检测。通常使用不同的荧光标记（如FAM标记O1群，HEX标记O139群）在同一反应体系中同时检测两种血清型。

在PCR扩增过程中，荧光信号随产物增加而增强，通过实时监测荧光信号变化，实现对霍乱弧菌O1群和O139群核酸的定性和/或定量检测。

检测样本：主要采集疑似霍乱患者的粪便、呕吐物或肛拭子样本，也可采集可疑污染的水样或食物样本。

操作步骤（以典型试剂盒为例）：

样本采集与核酸提取：

采集患者粪便、呕吐物或肛拭子样本，迅速送检。

使用核酸提取试剂盒提取样本中的总DNA，按照试剂盒说明书操作，确保DNA质量与纯度。

PCR反应体系配置：

根据试剂盒说明书，配制PCR反应体系，包括模板DNA、特异性引物、荧光探针、PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶等。

每个样本设置技术重复，同时设立阳性对照、阴性对照和空白对照。

PCR扩增与检测：

将反应管放入实时荧光定量PCR仪中，设置扩增程序（如预变性、变性、退火延伸等步骤）。

实时监测荧光信号，记录Ct值（循环阈值）。

结果分析：

通过PCR仪配套软件分析荧光信号，判断样本中是否存在霍乱弧菌O1群和/或O139群核酸。

根据Ct值判断阳性或阴性，通常Ct值越小，表示病毒载量越高。

操作特点：

双重检测：在同一反应体系中同时检测O1群和O139群，提高检测效率。

高灵敏度与特异性：荧光PCR法能够检测到极低浓度的霍乱弧菌DNA，且特异性高，减少假阳性结果。

快速检测：整个检测过程通常在数小时内完成，比传统的培养法更快，适合快速诊断和疫情控制。

定量与定性分析：不仅可以定性检测霍乱弧菌O1群和O139群的存在，还可以通过Ct值进行半定量分析。

自动化兼容：适用于自动化核酸提取和PCR检测平台，适合大规模样本筛查。

注意事项：

严格分区操作：为避免交叉污染，实验应分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区，各区物品专用。

对照设置：每次实验应设置阳性对照、阴性对照和空白对照，确保实验结果的准确性。

试剂保存：试剂盒中的试剂应按照说明书要求保存，通常需避光、低温保存，避免反复冻融。

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