霍乱弧菌 O1/O139/CTX 群检测试剂盒 ( 三重荧光 PCR 法 ) 新品

霍乱弧菌 O1/O139/CTX 群检测试剂盒 ( 三重荧光 PCR 法 )

试剂简介：

霍乱弧菌 O1/O139/CTX 群检测试剂盒 ( 三重荧光 PCR 法 ) 是一种用于同时检测霍乱弧菌 O1 群、O139 群以及 CTX 毒素基因的分子诊断工具，具有高效、灵敏和特异性强的特点。

检测原理

试剂盒采用三重荧光 PCR 技术，通过设计针对霍乱弧菌 O1 群特异性基因 (rfbO1)、O139 群特异性基因 (wbfO139) 以及 CTX 毒素基因 (ctxAB) 的特异性引物和荧光探针，实现对三种目标基因的同时扩增与检测。每种基因对应不同的荧光通道，通过荧光信号的实时监测，可准确判断样本中是否存在相应基因型的霍乱弧菌。

产品组成

PCR 反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg2等 PCR 反应必需成分。

酶混合液：含高保真 DNA 聚合酶、逆转录酶等。

特异性引物和探针：分别针对 rfbO1、wbfO139 和 ctxAB 基因设计，探针标记不同荧光报告基团（如 FAM、VIC、Cy5 等）和淬灭基团。

阳性对照：含已知浓度的 O1 群、O139 群核酸及 CTX 基因，用于验证试剂盒有效性。

阴性对照：不含目标基因，用于排除假阳性。

操作步骤

样品采集与处理：采集粪便、呕吐物、水样或食品样本，提取总 DNA。

试剂配制：根据待检样本数量，配制 PCR 反应混合液，每反应包含适量反应液、酶液、引物和探针。

加样：将提取的核酸、阳性对照和阴性对照加入反应管中，盖紧管盖。

PCR 扩增：将反应管置于荧光定量 PCR 仪中，设置扩增程序（如 95℃ 预变性，随后进行 40 个循环的变性、退火和延伸），并实时监测各荧光通道的信号。

结果分析：根据各荧光通道的 Ct 值判断结果，阳性对照应有典型 S 型扩增曲线，阴性对照应无扩增曲线。

操作特点

多重检测：同时检测 O1 群、O139 群及 CTX 毒素基因，提高检测效率。

高灵敏度和特异性：能够检测低浓度的目标基因，特异性引物和探针设计可有效区分不同基因型的霍乱弧菌。

快速检测：整个检测过程通常在 2-3 小时内完成，大大缩短了传统培养法所需的时间。

操作简便：试剂盒提供了一站式的检测解决方案，操作步骤简单，易于标准化和自动化。

注意事项

严格分区操作：为避免交叉污染，应将实验分为试剂准备区、样本处理区和 PCR 扩增区。

防污染措施：所有操作需戴一次性手套，使用带滤芯吸头，实验结束后彻底清洁工作台。

试剂保存：试剂盒组分应按照说明书要求保存，通常需要避光、低温保存，避免反复冻融。

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