CHO/dhFr-仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 新品

                                                            CHO/dhFr-仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
产品信息：

种属:中国仓鼠

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:上皮细胞样

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：IMDM+10% FBS +HAT添加剂 +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:3-1:4

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:CHO/dhFr-细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。在没有HT（次黄嘌呤-胸腺嘧啶）时，CHO/dhFr-细胞会死亡；CHO/dhFr-细胞生长培养基中加氨甲喋呤，可以防止对药物低抗性的回变细胞的生长。

年龄（性别）:Adult;Female

组织来源:正常卵巢

细胞类型:自发永生化细胞

生物安全等级:BSL-1

细胞特性：

来源与形态：CHO/dhFr-细胞源自中国仓鼠卵巢细胞，呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

遗传特性：该细胞系是dhfr基因缺陷突变株，无法自身合成四氢叶酸，必须依赖培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶（HT）维持生长。

应用价值：常用于基因工程药物生产，可通过添加氨甲喋呤（MTX）进行载体共扩增，实现外源基因的高表达。

培养条件：

培养基配方：IMDM或F12培养基，添加15%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-链霉素（P/S）、0.05mM次黄嘌呤、0.016mM胸腺嘧啶，必要时添加100nM氨甲喋呤。

培养环境：37℃，5% CO?，饱和湿度。

传代比例：细胞密度达80%-90%时传代，通常按1:2至1:5比例分瓶。

操作步骤：

细胞复苏：将冻存管在37℃水浴中快速解冻，加入预热培养基混匀后离心，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至培养瓶中，37℃培养过夜。

细胞传代：弃旧培养基，PBS润洗细胞，加入胰酶消化液消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱壁并分散，离心收集细胞后重悬于新鲜培养基中，按适当比例分瓶传代。

细胞冻存：收集对数生长期细胞，胰酶消化后离心收集，用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬，分装至冻存管中，使用程序降温盒逐步降温，-80℃过夜后转入液氮保存。

注意事项：

支原体检测：定期检测支原体污染，确保细胞纯净。

细胞状态：观察细胞形态和生长状态，及时调整培养条件。

生物安全：操作时需遵守生物安全规范，确保实验结果的准确性和可重复性。

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