P815小鼠肥大细胞瘤细胞 新品

产品信息：

种属:小鼠

生长特性:半贴半悬

细胞形态:肥大细胞

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：DMEM+10% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:2×10⁵ cells/mL

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:P815细胞源自DBA/2小鼠的肥大细胞瘤；P815细胞可吞噬乳胶微球，但不吞噬酵母聚糖或卡介苗；P815细胞没有抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。硫酸右旋糖酐、LPS或PPD不能抑制P815细胞生长；P815细胞产生溶菌酶，鼠痘病毒阴性。

年龄（性别）:Male

组织来源:肥大细胞；肥大细胞瘤

细胞类型:肿瘤细胞

肿瘤类型:其它肿瘤细胞

生物安全等级:BSL-1

基因表达情况:lysozyme

保藏机构:ATCC; TIB-64 DSMZ; ACC-1

1. 基础培养条件

培养基：

推荐使用RPMI-1640或DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S）。

具体配方示例：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S。

培养环境：

温度：37℃；气体环境：5% CO?、95%空气；湿度：饱和或70%-80%。

换液与传代：

换液周期：每2-3天更换新鲜培养基。

传代比例：1:2 至 1:4（细胞密度维持在1×10?–1×10? cells/mL）。

传代方法：

半贴壁细胞：轻吸培养上清，保留2-3mL培养基，轻柔吹打卡贴壁细胞；收集细胞悬液，900–1000rpm离心3-5min，弃上清，重悬后分瓶。

悬浮细胞：直接离心收集，重悬分瓶。

注意：贴壁细胞消化时使用0.25%胰酶-0.53mM EDTA，37℃消化1-2min，显微镜下观察细胞变圆即终止。

2. 冻存与复苏操作

冻存方法：

冻存液配方：90%完全培养基 + 10%DMSO，或无血清冻存液（液氮储存）。

操作：细胞悬液密度调至1–3×10? cells/mL，分装冻存管（1mL/管），程序降温（-80℃过夜后转入液氮）。

复苏方法：

37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基混匀，1000rpm离心3-5min，弃上清后重悬接种。

3. 关键操作注意事项

收货处理：

检查培养瓶是否破损、漏液；75%酒精消毒后，放入培养箱静置4-6小时稳定细胞状态。

显微镜观察细胞形态和密度，确认无污染。

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