OP9小鼠骨髓基质细胞 新品

                                                            OP9小鼠骨髓基质细胞
产品信息：

种属:小鼠

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:成纤维细胞样

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：MEMα+20% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:3-1:6

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:OP9细胞源自新生的op/op小鼠颅盖。因编码M-CSF的基因中的一个突变，OP9细胞不能生成有功能的巨噬细胞克隆刺激因子（M-CSF）。M-CSF的存在对胚胎干细胞（ES）分化成血细胞而不是其他巨噬细胞有抑制功能。OP9细胞可以用于与小鼠胚胎干细胞共培养以诱导胚胎干细胞分化成成红血球来源的、骨髓来源的和B细胞谱系的血细胞。与OP9细胞共培养不需要外源的生长因子或复杂的胚胎结构，这个系统对研究造血细胞的发育和分化的分子机理有用。

年龄（性别）:Embryo;Sex unspecified

组织来源:骨髓，基质

细胞类型:基质细胞系

生物安全等级:BSL-1

保藏机构:ATCC; CRL-2749

培养条件：

使用MEMα培养基（含20%胎牛血清FBS、1%青霉素-链霉素P/S），在37℃、5% CO?、95%空气的培养箱中培养，培养箱湿度维持70%-80%。

复苏步骤：

冻存管在37℃水浴快速解冻，混入含4-6 mL完全培养基的离心管，1000 RPM离心3-5 min，弃上清后重悬于新鲜培养基，接种至培养瓶，过夜培养后次日换液。

传代操作：

当细胞密度达80%-90%时进行传代。

弃旧培养基，PBS润洗1-2次；加入0.25%胰酶-EDTA（1-2 mL/ T25瓶），37℃消化1-2 min，显微镜下观察细胞变圆脱落，立即加入含血清培养基终止消化。

吹打成单细胞悬液，1000 RPM离心3-5 min，弃上清，重悬后按1:2至1:6比例分瓶（新培养瓶补足6-8 mL培养基）。

注意：新手建议逐个培养瓶操作，避免消化过度或交叉污染；熟练者可同时处理多个培养瓶，但需严格无菌。

冻存方法：

细胞生长良好时，胰酶消化后离心收集，用冻存液（如55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO或90%血清+10% DMSO）重悬，按1 mL/管分装，程序降温后液氮保存。

细胞特点与应用

核心特性：

形态：成纤维细胞样或上皮细胞样，贴壁生长。

遗传背景：携带M-CSF基因突变，缺失功能性M-CSF，从而促进胚胎干细胞向造血谱系（如红细胞、B细胞）分化，无需外源生长因子。

生长：传代周期2-3天，换液频率每周2-3次；密集培养时可能出现巨大空泡，属正常现象。

研究应用：

用于优化体外造血分化体系，如与小鼠胚胎干细胞共培养诱导分化，研究造血细胞发育机制。

运输与保存：

干冰运输冻存管（-80℃保存过夜后转入液氮）或常温运输复苏活细胞（T25瓶），收到后需酒精消毒并静置2-4 h观察细胞状态。

注意事项

无菌操作：全程严格无菌，定期检测支原体、细菌等污染（生物安全等级1级）。

血清浓度：FBS推荐10%-20%，过高或过低均影响细胞状态和实验重复性。

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