小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）elisa试剂盒

                                             小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）elisa试剂盒
核心信息

小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中uPA浓度的科研工具，采用双抗体夹心法或竞争法进行测定，适用于血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等多种生物样本。

核心原理与方法

检测原理：多数试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，即用抗小鼠uPA抗体包被微孔板，样本中的uPA与抗体结合后，再加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的亲和素，形成免疫复合物，最后通过TMB显色，OD值与uPA浓度呈正比。

 检测范围：通常为7.81–500 pg/mL，灵敏度可达4.69 pg/mL，满足高灵敏检测需求。

样本类型：支持血清、血浆（推荐EDTA抗凝）、细胞上清、组织匀浆、尿液、脑脊液等。

产品关键参数

反应类型  双抗体夹心法 / 竞争法

灵敏度  4.69–7.8125 pg/mL

检测范围  7.81–500 pg/mL（部分可达1000 pg/mL）

样本体积  10–100 μL（依稀释倍数而定）

反应时间  约4.5小时

板内/板间变异系数  <10%

回收率范围  90–110%

保存条件  2–8℃避光保存，有效期6个月

标准操作流程概览

试剂准备：所有试剂平衡至室温（15–30分钟），浓缩洗涤液需稀释25–30倍，如有结晶可水浴加热溶解。

标准品稀释：按说明书进行梯度稀释，常用7个浓度点+空白对照。

加样：设标准品孔、样本孔、空白孔，建议双复孔或三复孔以提高数据可靠性。

温育与洗涤：37℃温育30–60分钟，洗板5次，拍干残留液体。

加酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，避光温育。

显色与终止：加入TMB显色液，37℃避光反应10–15分钟，加终止液（如2M H?SO?）终止反应。

读数与计算：在450nm波长下测定OD值，以标准曲线计算样本浓度。

注意事项与质量控制

样本处理：避免溶血、高血脂，防止反复冻融，提取后尽快检测或–20℃保存。

试剂使用：不同批号试剂不可混用，封板膜一次性使用，底物避光保存。

安全防护：操作时佩戴手套、护目镜，所有样品和废弃物按传染性物质处理。

结果判定：必须使用酶标仪读数，建议每次实验均做标准曲线。

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