人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

规格：48T/96T

保存条件：试剂盒2-8℃保存，标准品及样本建议-20℃冻存，避免反复冻融。

有效期：6个月（以包装标注为准）

实验原理

采用双抗体夹心法。预包被抗人IL-1β抗体捕获样本中的IL-1β，加入HRP标记的检测抗体后形成复合物，通过底物显色反应测定450nm波长下的吸光度（OD值），其强度与IL-1β浓度成正比。

试剂盒组成

预包被微孔板

IL-1β标准品（浓度梯度：X pg/mL至Y pg/mL）

样本稀释液

HRP标记检测抗体

洗涤液（10×浓缩液，需稀释）

底物A/B

终止液

封板膜

操作步骤

平衡与分组

取出试剂盒室温平衡20分钟，剩余板条密封后4℃保存。

设置标准品孔（6个浓度梯度）、样本孔及空白孔（建议复孔）。

加样

标准品孔：加入50μL不同浓度标准品。

样本孔：先加10μL待测样本，再加40μL稀释液（最终稀释倍数1:5）。

空白孔：加入50μL蒸馏水。

孵育与洗涤

每孔加入100μL HRP标记抗体（空白孔除外），37℃孵育60分钟。

弃液后洗涤5次：每孔加满洗涤液，静置30秒后拍干。

显色与终止

加入底物A/B各50μL，37℃避光反应15分钟。

加入50μL终止液，15分钟内测定450nm OD值（参考波长630nm校正）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

根据样本OD值计算IL-1β浓度，若样本超出检测范围需进一步稀释。

注意事项

样本处理：血清/血浆需离心去除颗粒物，避免溶血；细胞培养上清需去除沉淀。

灵敏度：检测下限通常为X pg/mL，线性范围Y-Z pg/mL。

交叉反应：与IL-1α、IL-1RA等无显著交叉反应。

质量控制：建议每次实验包含质控样本。

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