人基质细胞衍生因子1(SDF-1/CXCL12)ELISA试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中的SDF-1含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。

实验原理

固相包被：微孔板预包被纯化SDF-1抗体。

反应步骤：依次加入样本或标准品、生物素化SDF-1抗体、HRP标记亲和素，经洗涤后以TMB显色。

显色机制：TMB在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸化后转为黄色，颜色深度与SDF-1浓度正相关。

检测：450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

酶标板：96孔（可拆卸）。

标准品（冻干粉）：2瓶（4,000 pg/ml初始浓度），临用前需以稀释液复溶并梯度稀释至31.2–2,000 pg/ml系列浓度。

其他组分：

生物素化抗体

HRP标记亲和素

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

封板膜、密封袋

样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液等。

处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，2–8℃短期保存（≤24小时），长期保存需≤-20℃。

操作步骤

标准品制备：复溶后稀释为7个浓度梯度。

加样：每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板3次。

加生物素化抗体：100μL/孔，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：100μL/孔，37℃避光反应30分钟。

显色：加TMB 90μL/孔，避光显色15–30分钟。

终止：加终止液50μL/孔，立即测定OD450nm。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，拟合回归方程。

样本浓度通过曲线方程计算，稀释样本需乘以稀释倍数。

性能参数

灵敏度：≤31.2 pg/ml。

精密度：批内变异系数（CV）<9%，批间CV<11%。

线性范围：31.2–2,000 pg/ml（具体范围可能因批次调整）。

保存与有效期

未开封试剂盒：2–8℃保存，有效期6个月。

开封后：酶标板需密封干燥保存，标准品及抗体建议分装冻存。

注意事项

避免试剂接触皮肤或黏膜，操作时佩戴防护用具。

不同批次试剂不可混用。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

样本中不得添加NaN3，以免抑制酶活性。

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