兔脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测兔血清、血浆或细胞培养上清等样本中的BDNF浓度。将特异性抗兔BDNF抗体包被于微孔板，加入样本及标准品后，与HRP标记的检测抗体形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤后，加入底物TMB显色，在HRP催化下产生颜色反应（蓝色→黄色），其吸光度（450 nm）与样本中BDNF浓度呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

技术参数

检测范围：31.2–2000 pg/mL

最低检测限：7.8 pg/mL

特异性：可识别天然或重组兔BDNF，与相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月（未开封条件下）。

试剂盒组成

预包被微孔板（48孔或96孔配置）

BDNF标准品（冻干粉或溶液）

HRP标记检测抗体

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

TMB显色底物、终止液

封板膜、说明书

样本处理

血清：血液采集后静置30分钟，3000×g离心10分钟分离血清。

血浆：建议使用EDTA/肝素抗凝，3000×g离心30分钟取上清。

细胞上清：离心去除颗粒物后直接检测。

注：避免反复冻融，-20℃保存（长期）或2–8℃短期保存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

显色：加入TMB避光反应15分钟，终止后30分钟内读数。

注意事项

试剂盒保存：-20℃（长期）；2–8℃（频繁使用）。

浓洗涤液盐析时需37℃水浴助溶。

中英文说明书冲突时以英文版为准。

预期应用

适用于神经科学研究中BDNF的定量分析，如神经退行性疾病模型、药物筛选等。

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