兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒

用途：本试剂盒用于定量检测兔血清、血浆或其他生物液体中骨桥蛋白（OPN）的浓度，适用于医学研究、疾病机制探究及生物标志物分析。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被兔OPN特异性抗体，形成固相抗体。

样本孵育：加入待测样本或标准品，OPN与固相抗体结合。

酶标抗体：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下显蓝色，终止液转化为黄色。

定量分析：450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本OPN浓度。

试剂盒组成

| 组分 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存条件 |

| 酶标包被板 | 1×48孔 | 1×96孔 | 2-8℃ |

| OPN标准品（45μg/L）| 0.5mL×1瓶 | 0.5mL×1瓶 | 2-8℃ |

| 标准品稀释液 | 1.5mL×1瓶 | 1.5mL×1瓶 | 2-8℃ |

| HRP酶标试剂 | 3mL×1瓶 | 6mL×1瓶 | 2-8℃ |

| 显色剂A/B液 | 各3mL×1瓶 | 各6mL×1瓶 | 2-8℃（避光）|

| 终止液 | 3mL×1瓶 | 6mL×1瓶 | 2-8℃ |

| 封板膜、密封袋 | 按需配置 | 按需配置 | 室温 |

操作步骤

标准品稀释：用标准品稀释液梯度稀释至0.7-45μg/L。

加样：每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后拍干，加洗涤液静置30秒，重复5次。

加酶标抗体：每孔加HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15-20分钟。

终止与检测：加终止液50μL，30分钟内测定OD450值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

样本避免溶血或脂血，建议离心后取上清检测。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

标准曲线需每次实验重新绘制。

技术参数

检测范围：0.7-45μg/L

灵敏度：<0.3μg/L

批内变异系数：<10%

批间变异系数：<15%

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