大鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员5(CD40)ELISA试剂盒

商品属性

产品基本信息

检测原理：基于双抗体夹心ELISA法，特异性识别大鼠CD40抗原。

灵敏度：≤0.1 ng/mL（具体以实际标定为准）。

检测范围：0.156–10 ng/mL（线性范围内可定量）。

样本类型：适用于血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清液。

样本处理要求

采集与保存：

使用无热原、无内毒素抗凝管（EDTA/肝素/柠檬酸盐均可）。

避免溶血或高脂血样本，离心去除悬浮物后检测。

短期保存（48小时内）置于2–8℃；长期需分装冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

样本稀释：

高浓度样本需用专用稀释液预稀释，确保检测值在标准曲线范围内。

试剂盒组成

预包被CD40抗体的96孔微孔板

CD40标准品（冻干粉，需复溶）

生物素标记检测抗体

辣根过氧化物酶（HRP）标记链霉亲和素

显色底物（TMB）及终止液

浓缩洗涤液（20×，需1:20稀释）

实验步骤

标准品配制：

取标准品冻干粉，加入指定体积稀释液复溶，梯度稀释为6–7个浓度点（如10 ng/mL至0.156 ng/mL），设立空白对照。

加样与孵育：

每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤后加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

信号检测：

加入TMB底物避光显色15–30分钟，终止反应后450 nm波长读取吸光度。

数据计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

注意事项

实验前需平衡所有试剂至室温（18–25℃）。

避免交叉污染，不同步骤使用独立吸头。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

应用范围

科研用途，适用于免疫调控、炎症反应及肿瘤微环境研究中CD40表达水平的定量分析。

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