大鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒

商品属性

检测方法：双抗体夹心法

保存条件：未开封试剂盒2-8℃保存；开封后按组分要求保存（部分需-20℃）

有效期：12个月

检测原理

试剂盒采用特异性抗大鼠IL-15抗体预包被微孔板，通过夹心法原理定量检测样本中的IL-15浓度。步骤包括：

样本与生物素标记抗体结合。

加入HRP标记的链霉亲和素形成复合物。

TMB显色，终止后测定450nm吸光度（OD值）。

通过标准曲线计算IL-15浓度。

试剂盒组分

| 组分名称 | 数量 | 规格/浓度 |

| 预包被微孔板 | 1块 | 96孔（12条×8孔）|

| 大鼠IL-15标准品 | 2支 | 浓度梯度（如0-500 pg/mL） |

| 生物素标记抗体 | 1瓶 | 120 μL |

| HRP标记链霉亲和素 | 1瓶 | 120 μL |

| 样本稀释液 | 1瓶 | 15 mL |

| TMB显色液 | 1瓶 | 10 mL |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶 | 10 mL |

| 洗涤液（20×浓缩） | 1瓶 | 30 mL |

样本要求

样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆液

处理建议：

血清/血浆：离心去除颗粒，避免反复冻融。

细胞上清：离心去除沉淀。

组织样本：PBS匀浆后离心取上清。

操作步骤（简要流程，具体以实际为准）

标准品稀释：按说明书梯度稀释（如0、31.25、62.5、125、250、500 pg/mL）。

加样：标准品/样本各100 μL加入对应孔，37℃孵育90分钟。

洗板：洗涤液洗3次。

加生物素抗体：每孔100 μL，37℃孵育60分钟。

加HRP标记物：洗板后加100 μL，37℃避光孵育30分钟。

显色：加TMB 90 μL，避光反应15-20分钟。

终止：加终止液50 μL，立即测OD450nm。

结果计算

绘制标准曲线（横坐标：标准品浓度；纵坐标：OD值）。

根据样本OD值，从曲线中计算浓度。

若样本稀释，需乘以稀释倍数。

性能参数

灵敏度：<10 pg/mL

检测范围：15.6-1000 pg/mL

回收率：85%-115%

批内/批间差：CV <10%

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

实验前平衡所有组分至室温（20-25℃）。

精确控制孵育时间和温度。

终止后30分钟内完成读数。

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