大鼠促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 新品

商品属性

产品基本信息

规格：96孔/板（可适配48孔配置）

检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）

用途：定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液等样本中的EPO含量，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

保存条件：2-8℃冷藏，有效期6个月。

检测原理

采用双抗体夹心法：

包被：微孔板预包被抗大鼠EPO单克隆抗体。

结合：样本中的EPO与固相抗体结合后，加入生物素标记的抗大鼠EPO二抗，形成“抗体-抗原-二抗”复合物。

显色：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色（蓝色→黄色），颜色深度与EPO浓度正相关。

测定：酶标仪在450 nm波长下检测吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

样本处理要求

血清：室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃保存时避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃下1000×g离心15分钟，分离上清。

细胞培养上清：离心后直接取上清，-20℃保存。

细胞裂解液：PBS洗涤细胞3次，-20℃反复冻融3次或使用裂解液，600×g离心10分钟取上清。

标准品配制

原液浓度：120 mU/mL，临用前15分钟内稀释为系列梯度（60、30、15、7.5、3.75、1.87 mU/mL），样品稀释液作为0 mU/mL空白对照。

稀释方法：例如配制60 mU/mL标准品，取0.5 mL原液加0.5 mL稀释液混匀，其余梯度依此类推。

操作步骤概要

加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后拍干，加入洗涤液清洗3次。

加二抗：每孔加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：加入HRP标记亲和素，37℃避光孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15-30分钟，终止后测定OD值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

不同批次试剂组分不可混用。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

实验废弃物需按生物危害品规范处理。

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