大鼠半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液及其他相关液体样本中的半乳糖凝集素-9（GAL9）含量，适用于科研实验，不用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠GAL9抗体，捕获样本中的目标蛋白。

检测抗体：加入生物素标记的二抗与GAL9结合，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大：通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与生物素结合，催化底物显色，吸光度（OD值）与GAL9浓度成正比。

样本处理

血清/血浆：采集后离心（2000-3000 rpm，20分钟），分离上清液，避免溶血或反复冻融。

细胞培养上清：直接离心去除颗粒物；检测细胞内成分需裂解细胞（PBS悬浮后冻融离心）。

尿液等其他体液：离心后取上清，沉淀需二次离心去除。

保存条件：短期（24小时）可存于2-8℃，长期需-80℃保存。

试剂盒组成

预包被微孔板

GAL9标准品（浓度梯度）

生物素标记检测抗体

HRP标记链霉亲和素

洗涤缓冲液、显色底物（TMB）、终止液

说明书及质检报告

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释，建立标准曲线。

加样孵育：样本与标准品加入微孔板，37℃孵育1小时。

洗涤：缓冲液洗板5次，去除未结合物。

检测抗体孵育：加入生物素化抗体，37℃反应1小时。

酶结合物反应：加入HRP-链霉亲和素，避光孵育30分钟。

显色与终止：TMB显色10-15分钟，终止液终止反应。

读数：450 nm波长测定OD值，计算浓度。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，避免反复冻融标准品。

实验前平衡至室温（20-25℃），避免交叉污染。

显色时间需严格控制，强阳性样本可能需稀释后复测。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以试剂盒批次为准）。

灵敏度：≤5 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他凝集素家族蛋白交叉反应。

批间差：CV＜15%。

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