小鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），通过特异性抗体结合小鼠样本中的CHGA抗原，经辣根过氧化物酶（HRP）催化显色反应，定量检测CHGA浓度。

技术参数

检测范围：31.25–2000 pg/mL

灵敏度：≤12.3 pg/mL

样本类型：血清、血浆、组织匀浆液等

规格：96T/48T

保存条件：2–8℃避光保存，有效期12个月

操作步骤

平衡与准备

试剂盒从冷藏环境取出后需室温平衡30分钟，未使用的板条需密封保存于4℃。

浓洗涤液若有结晶，37℃水浴溶解后使用。

加样与孵育

设置标准品孔（梯度浓度）、样本孔及空白孔，分别加入标准品或样本50μL。

除空白孔外，每孔加入HRP标记检测抗体100μL，封板后37℃孵育60分钟。

洗涤

弃去孔内液体，每孔加洗涤液350μL，静置1分钟后甩干，重复5次。

显色与终止

每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

加入终止液50μL，反应液由蓝变黄后15分钟内测定OD值（450nm波长）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过回归方程计算样本浓度。

若样本OD值超出标准曲线范围，需用稀释液稀释后重新检测，最终浓度乘以稀释倍数。

注意事项

实验需使用校准的加样器，建议复孔检测以提高准确性。

避免反复冻融样本，高浓度样本需预稀释。

终止反应后应及时检测，避免显色过度影响结果。

废弃样本及耗材需按生物危害废物处理。

常见问题

标准曲线线性不佳：检查标准品稀释步骤或孵育时间是否一致。

背景过高：确保洗涤充分，避免交叉污染。

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