大鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)ELISA试剂盒

规格：96T/48T (即96孔或48孔测试规格)

用途：仅供研究使用，用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)含量。

检测范围：1μg/L - 60μg/L。

实验原理

应用双抗体夹心法：

① 用纯化的ALPL抗体包被微孔板制成固相抗体；

② 依次加入待测样本、HRP标记的ALPL抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物；

③ 洗涤后加入底物TMB显色，颜色深浅与样本中ALPL浓度正相关；

④ 用酶标仪在450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

30倍浓缩洗涤液：20ml ×1瓶

酶标试剂：6ml ×1瓶（HRP标记抗体）

酶标包被板：12孔×8条（96孔板）

样品稀释液：6ml ×1瓶

显色剂A液：6ml ×1瓶

显色剂B液：6ml ×1瓶

终止液：6ml ×1瓶

标准品(240 ng/L)：0.5ml ×1瓶

标准品稀释液：1.5ml ×1瓶

说明书：1份

封板膜：2张

密封袋：1个

注：摘要2未列出具体组分，以摘要1和摘要3为准。

样本要求

采集后尽早按文献方法提取，尽快实验；

如需保存，置于-20℃，避免反复冻融；

不可检测含NaN3的样品（NaN3会抑制HRP酶活性）。

操作步骤（关键点）

标准品稀释：

原倍标准品（240μg/L）按梯度稀释（例）：

60μg/L（5号）：150μl原品 + 150μl稀释液

30μg/L（4号）：150μl 5号 + 150μl稀释液

15μg/L（3号）：150μl 4号 + 150μl稀释液

（其余梯度参照说明书）

加样与孵育：依次加入标准品、样本、酶标试剂，37℃避光孵育。

洗涤：用稀释后的洗涤液充分洗涤5次。

显色：加入显色剂A、B液，37℃避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液，30分钟内于450nm测OD值。

注意：操作细节（加样量、时间）需严格参照试剂盒内说明书。

注意事项

试剂盒使用前需在室温平衡15-30分钟；

浓缩洗涤液若有结晶，可水浴加温助溶；

推荐使用加样器/排枪，控制加样时间≤5分钟；

每次实验需同步做标准曲线，建议复孔；

样本OD值过高时，需用样品稀释液稀释后检测，计算时乘以稀释倍数；

封板膜一次性使用，避免污染；

底物避光保存；

不同批次组分不可混用。

保存条件与有效期

保存：2-8℃冷藏

有效期：6个月（生产日期见包装）

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