HL-1小鼠心肌细胞

HL-1小鼠心肌细胞

 基本特性:

HL-1心肌细胞系是1997年从Jackson实验室的一只成年雌性近交系C57BLy 6J小鼠中切除的皮下肿瘤中建立，该小鼠为转染了由心房利钠因子启动子和SV40区域组成的融合基因的转基因小鼠。HL-1细胞是一种永生化的小鼠心肌细胞系，能够持续分裂和自发收缩，同时保持已分化的心脏表型。HL-1细胞可以连续传代且不会失去其分化的特异性心肌细胞表型，包括形态、生化和电生理特性等，常用于研究正常心肌细胞在信号转导、细胞代谢和转录调控方面的功能，以及体外模拟诸如缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等ϜᾀϜ

一、来源与构建背景

起源与转基因技术

HL-1细胞源自成年雌性C57BL/6J小鼠的皮下肿瘤，该肿瘤由转心房利钠因子（ANF）启动子与SV40大T抗原融合基的转基因小鼠诱导产生。该构建方法使细胞突破正常分裂周期限制，同时保留心肌细胞分化表型。

关键特征

永生化：通过SV4T抗原突破海弗里克极限，可无限传代（>100代）而不丧失功能。

表型稳定性：持续表达α-肌球蛋白重链（α-MHC）、ANF、connexin43等成熟心肌标志物，与原代心肌细胞电生理特性高度相似。

二、细胞特性与培养条件

形态与生长特性

形态：成纤维细胞样，贴壁生长但贴壁性较弱，部分细胞呈圆形漂浮。

增殖：倍增时间约35-50小时，推荐传代比例1:2-1:4，密度达80%-90%时需传代。

自发收缩：在同步培养中形成节律性跳动，模拟心脏搏动。

培养体系

基础培养基：Claycomb培养基含10%胎牛血清（FBS）、0.mM去甲肾上腺素、mL-谷氨酰胺。

培养环境：37℃、5CO、湿度70%-80%，需使用高吸附培养瓶或明胶包被（如CSP132）以增强贴壁。

冻存条件：90FB10DMSO冻存液，程序降温后转液氮保存。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。