GL-261+luc小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记

GL-261+luc小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记

 基本特性:

1939年3-甲基胆蒽颅内注射诱导Gl261肿瘤，经C57BL/6小鼠体内培养，经同基因小鼠株连续移植维持，于1990年代中期建立体外生长细胞培养;文献中描述了携带TP53和KRAS突变的细胞,该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1） 来源：小鼠，胶质瘤

2） 形态：贴壁生长，胶质细胞，成纤维细胞样

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

一、来源与构建背景

起源与诱导方法

GL-261细胞最初通过1939年对C57BL/6小鼠颅内注射3-甲基胆蒽（3-MC）诱导产生胶质瘤，经同基因小鼠连续移植维持，于1990年代中期建立体外培养体系。荧光素酶标记版本通过慢病毒转染技术将Luc基因整合至基因组，保留原代肿瘤的TP53和KRAS突变特性。

关键基因修饰

Luc基因：增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与荧光素酶双标记版本（如GL26Red-FLuc）进一步优化了成像灵敏度。

突变特征：TP53（约50%病例）和KRAS突变（约30%）模拟人类GBM常见遗传变异。

二、细胞特性与培养条件

形态与生长特性

形态：贴壁生长，呈成纤维细胞样，部分文献描述为上皮样。

增殖：倍增时间约24-48小时，推荐传代比例1:2至1:5，密度达80%-90%时需传代。

冻存：推荐冻存液为90%胎牛血清（FBS）+10DMSO，复苏后存活率>90%。

培养体系

基础培养基：DMEM/F12（87%）+10FBS+1GlutaMAX+1%青霉素-链霉素（P/S）。

筛选条件：需添加嘌呤霉素（终浓度1-μg/mL）维持Luc表达，筛选后需定期巩固（每10代一次）。

环境：37℃、5CO、湿度70%-80%。

三、应用领域

肿瘤生长与转移研究

活体成像：通过生物发光实时监测颅内或皮下肿瘤动态，评估药物疗效（如溶瘤病毒、免疫检查点抑制剂）。

转移模型：颅内接种可模拟GBM局部侵袭，脾脏注射可研究血行转移。

免疫微环境解析

免疫细胞浸润：发现Luc标记细胞可能通过上调IL-4、TGF-β2等因子重塑肿瘤微环境，影响CD8T细胞和Treg比例。

治疗评估：用于评估免疫治疗（如PD-1抑制剂）对免疫抑制性微环境的逆转效果。

药物筛选与机制研究

化疗敏感性：测试烷化剂（如替莫唑胺）或靶向药物（如BRAF抑制剂）的疗效。

代谢重编程：研究氧化应激下小胶质细胞与肿瘤细胞的相互作用对代谢的影响。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。