CT26+LUC小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记

细胞属性：

CT26细胞是被N-亚硝基-N-甲基脲烷（NNMU）诱导得到的未分化的小鼠结肠癌细胞，该细胞的一个克隆形成的细胞系被命名为CT26.WT。CT26.WT被逆转录病毒载体LXSN稳定转化形成了一个致死性的亚克隆CT26.CL25，这一病毒载体含有lacZ基因、编码肿瘤相关抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25细胞在小鼠中生长速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25细胞可以表达肿瘤相关抗原和beta半乳糖苷酶，因此这两株细胞可以联合用于免疫治疗和宿主免疫反应的研究。

1细胞系背景与构建原理

基础来源

母系CT26.WT源BALB/c小鼠结肠癌，是一种未分化腺癌细胞，具有高侵袭性和转移性。

荧光素酶标记（LuciferaseLUC通过慢病毒或逆转录病毒转萤火虫荧光素酶基因（Fluc），实现生物发光成像。

标记稳定性

荧光素酶基因整合至基因组，长期传代后仍稳定表达（需定期用D-荧光素验证活性）。

2核心特性与实验优势

体内外追踪能力

体外检测：添加底物D-荧光素后，通过化学发光仪（如IVIS系统）定量发光强度，反映细胞数量/活性。

体内成像：移植至小鼠后，实时无创监测肿瘤生长、转移（灵敏度高，可检测微小病灶）。

应用场景

肿瘤治疗评估：化疗/免疫治疗疗效的动态监测。

转移研究：肺、肝转移模型的活体追踪（需注意BALB/c小鼠的免疫相容性）。

3培养与实验关键参数

培养条件

培养基：RPMI-16410FBS，37℃、5CO。

抗性筛选：若载体含抗性基因（如嘌呤霉素），需定期加压维持标记稳定性。

体内实验要点

接种量：通常1×10~1×10细胞/小鼠（皮下或原位注射）。

成像前处理：腹腔注射D-荧光素（15mg/kg），10分钟后麻醉成像。

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