AML-12小鼠肝实质细胞

细胞属性：

 此AML12（α小鼠肝脏12）细胞系由来自针对人TGFα的转基因小鼠（CD1菌株，品系MT42）的肝细胞建立。通过电子显微镜观察，这些细胞表现出典型的肝细胞特征，例如过氧化物酶体和胆小管样结构。AML12细胞保留表达血清（白蛋白，α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白）和间隙连接（连接蛋白26和32）蛋白的高水平mRNA的能力，并且仅含有乳酸脱氢酶的同工酶5。细胞表达高水平的人TGFα和较低水平的小鼠TGFα。

肝脏特异性蛋白质的表达在培养中随时间降低，但通过在无血清培养基中培养细胞而重新激活。。

1细胞系基础信息

来源与特性：

源自转基因小鼠（过表达人TGF-α）的肝实质细胞，保留正常肝细胞极性及功能，非肿瘤源性。

表达肝细胞标志物：白蛋白（Albumin）、细胞角蛋白18（CK18）、转铁蛋白（Transferrin）。

典型应用：肝细胞代谢、毒性测试、纤维化及脂肪变性模型。

培养条件：

培养基：DMEM/F110FBITS（胰岛素-转铁蛋白-硒4ng/mL地塞米松。

传代：0.05%胰酶-EDTA消化，1:3分传，避免过度汇合（>90%可能导致功能丧失）。

2核心研究应用

肝脏疾病模型：

脂肪肝（NAFLD/NASH）：通过游离脂肪酸（如棕榈酸/油酸）诱导脂质积累，油红O染色定量。

肝纤维化：TGF-β1刺激后检测α-SMA、胶原沉积（天狼星红染色）。

药物代谢与毒性：

评估药物肝毒性（如对乙酰氨基酚），检测CYP450酶活性。

与Kupffer细胞共培养模拟免疫毒性反应。

3实验关键注意事项

功能维持：

定期检测白蛋白分泌（ELISA）及尿素合成能力（尿素检测试剂盒），确保细胞未去分化。

避免长期传代（建议<20代），高代次细胞可能丧失代谢活性。

支原体污染：需每月PCR检测（如MycoAlert试剂盒）。

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