人CD4+CD25+CD127低表达调节性T细胞分选试剂盒 II

人CD4+CD25+CD127低表达调节性T细胞分选试剂盒 II

产品概述

人CD4+CD25+CD127低表达调节性T细胞分选试剂盒 II 是一款用于从人外周血单个核细胞（PBMCs）中分离CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞（Treg细胞）的先进试剂盒。该试剂盒采用两步分选程序，能够高效、精准地分离出高纯度的Treg细胞，为免疫学研究、疾病机制探索以及细胞治疗开发提供有力支持。

背景知识

CD127（IL-7受体α链）在大多数成熟T细胞上表达，对T细胞的增殖和分化起着关键作用。然而，在调节性T细胞上，CD127的表达缺失，且其表达水平与FoxP3（调节性T细胞的关键转录因子）的表达呈负相关。因此，CD127可作为区分人调节性T细胞和活化T细胞的额外标志物。利用CD4、CD25和CD127的表达特征，可以精确地鉴定和分离具有免疫调节功能的Treg细胞。

详细分选程序

1. 第一步：非CD4+和CD127高表达细胞的去除

• 使用生物素标记的抗体混合物和抗生物素微磁珠，对非CD4+细胞以及CD127高表达细胞进行标记。

• 通过磁分离技术，将这些不需要的细胞去除，从而得到富含CD4+CD127低表达细胞的中间组分。

2. 第二步：CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞的阳性选择

• 对第一步得到的CD4+CD127低表达细胞的流穿组分，进一步用CD25微磁珠进行标记。

• 再次利用磁分离技术，实现对CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞的阳性选择，最终获得高纯度的Treg细胞。

下游应用

该试剂盒分离得到的CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞可用于多种下游实验，包括：

• 表型分析 ：通过流式细胞术检测细胞表面标志物的表达，进一步鉴定Treg细胞的亚群和状态。

• 功能验证 ：评估Treg细胞对其他免疫细胞（如效应T细胞、B细胞等）的抑制功能，研究其在免疫调节中的具体作用机制。

• 细胞治疗研究 ：为开发基于Treg细胞的免疫治疗策略提供细胞来源，探索其在自身免疫疾病、移植排斥反应等疾病治疗中的应用潜力。

试剂盒组成

试剂盒包含分选所需的各类试剂和耗材，具体如下：

• 抗体混合物 ：包括针对CD4、CD25、CD127等特定细胞表面标志物的高特异性抗体，用于精准标记目标细胞或不需要的细胞。

• 微磁珠 ：与抗体结合后的微磁珠能够使标记的细胞在磁场中被捕获或分离，实现细胞的磁性分选，包括抗生物素微磁珠和CD25微磁珠等。

• 分选柱 ：用于磁分离过程的专用柱子，如LD或autoMACS®柱用于第一步的去除过程，MS或autoMACS柱用于第二步的阳性选择过程。

应用仪器

本试剂盒适用于多种常见的细胞分选仪器，包括但不限于：

• LD或autoMACS®柱 ：用于第一步的去除过程，实现非CD4+和CD127高表达细胞的去除。

• MS或autoMACS柱 ：用于第二步的阳性选择过程，对CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞进行富集和分离。

注意事项

在使用本试剂盒进行实验时，请注意以下事项：

• 样本准备 ：确保人PBMCs样本的新鲜度和质量，按照标准操作规程进行细胞分离和处理，以获得最佳的分选效果。

• 操作规范 ：严格按照试剂盒说明书进行操作，特别是在抗体孵育时间、温度以及磁分离步骤等方面，遵循推荐的条件，避免因操作不当导致细胞损伤或分选效率降低。

• 安全防护 ：实验过程中请佩戴适当的个人防护装备，如手套、护目镜和实验服等，避免接触有害化学物质和生物样本。

通过本试剂盒的使用，研究人员能够高效、精准地分离出人CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞，为进一步深入研究免疫调节机制、疾病发生发展以及开发新型免疫治疗策略提供关键的细胞资源。