还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽活性测定试剂盒 | Reduced Glutathione & Oxidized Glutathione | GSH & GSSG | EnkiLife恩玑生命

产品简介

本试剂盒可以分别检测出GSH(还原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽，oxidized glutathione disulfide)含量。谷胱甘肽(glutathione)是一种由3个氨基酸残基组成的小肽，全称为谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸，英文名称为glutamyl-cysteinylglycine，简称为glutathione。由于半胱氨酸上的巯基(SH)为谷胱甘肽的活性基团，所以常简写为G-SH或GSH。谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽(reduced glutathione，常称为GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide)两种形式。由于氧化型谷胱甘肽是由两个GSH通过巯基脱氢而成，所以常简写为G-S-S-G或GSSG。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维持蛋白质中巯基适当的氧化还原状态有重要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常 90-95%为还原型谷胱甘肽。

产品特点

★本试剂盒检测下限为0.5μM，可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中GSH和GSSG的含量。

★本试剂盒提供了蛋白去除试剂M，可以更加准确地测定含有蛋白的样品。

检测原理     

通过谷胱甘肽还原酶把GSSG还原成GSH，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定412nm处的吸光度值就可以计算出总谷胱甘肽的量。用适当试剂先清除样品中的GSH，然后利用上述反应原理就可以测定出GSSG的含量。用总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量，就可以计算出GSH的含量。

本试剂盒的具体反应原理如下：

两个反应相合并：

产品组分

保存条件

未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。

注意事项

1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。

2. 一定要严格控制反应时的温度和反应时间，否则每次都需做标准曲线。

3. NADPH等试剂不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。

4. 蛋白去除试剂M溶液必须新鲜配制并限当日使用。GSH清除试剂也须新鲜稀释后使用。

5. 蛋白去除试剂M较难溶解，可以通过剧烈vortex并适当加热(不超过37ºC)以促进溶解。

6. DMSO在4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。