F4N (MEL 小鼠红白血病细胞

F4N (MEL 小鼠红白血病细胞

 基本特性:

种属来源:小鼠

性别年龄:无

组织来源:血液

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS) +1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 3-4天传1代

溯源与分子特征

物种与类型：

源自 DBA/2小鼠 红白血病模型（Friend virus诱导），属 终末分化阻滞的红系前体细胞，模拟人类红白血病（AML-M6亚型）。

关键突变：

Friend病毒整合导致 Spi-1/PU.1过表达（抑制红系分化）。

常见 GATA-1功能缺失（通过表观沉默或突变）。

分化潜能：

可被化学诱导剂（如DMSO、HMBA）促分化为正红系细胞（血红蛋白合成增加）。

培养特性

形态：悬浮生长，细胞小而圆，胞质嗜碱性，无自发血红蛋白沉淀。

增殖：倍增时间约12-16小时，需高密度培养（维持1-2×10cells/mL）。

2. 核心科研应用

红系分化研究

分化机制：

研究 表观遗传调控（如DNA去甲基化剂5-aza诱导GATA-1再激活）。

单细胞RNA-seq解析分化阻滞的异质性。

药物筛选：

测试促分化剂（如SCD抑制剂）联合EPO的协同效应。

白血病模型

移植模型：尾静脉注射免疫缺陷鼠（NSG）可模拟白血病骨髓浸润。

耐药机制：通过长期暴露于阿糖胞苷筛选化疗耐药亚克隆。

3. 标准化操作体系

培养方案

培养基：IMDM + 15% FBS + 2 mM GlutaMAX + 0.1 mM β-巯基乙醇（防氧化）。

传代要点：

直接离心（300g, 5分钟）后重悬，无需消化。

维持密度≥5×10cells/mL（低密度导致分化停滞）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。