RBL2H3大鼠嗜碱细胞白血病细胞

RBL2H3大鼠嗜碱细胞白血病细胞

 基本特性:

种属来源:大鼠

性别年龄:雌性

组织来源:外周血

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:EMEM + 15% h.i. fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1：4到1：8传代，2-3天传1代

1. 细胞系背景

来源与特性：

起源：RBL-2H3源自Wistar大鼠的嗜碱细胞白血病（Basophilic Leukemia），是一种肥大细胞（Mast Cell）模型，广泛用于过敏与炎症研究。

功能特征：

高亲和力IgE受体（FcεRI）表达：可通过IgE交联激活，模拟肥大细胞脱颗粒过程（释放组胺、β-氨基己糖苷酶等）。

信号通路研究：常用于分析FcεRI介导的MAPK、NF-κB通路活化。

遗传稳定性：长期传代后仍保留肥大细胞表型（如类胰蛋白酶表达）。

2. 研究应用

过敏与免疫学：

研究IgE介导的速发型超敏反应（如药物过敏、哮喘机制）。

评估抗过敏药物（如奥马珠单抗）或天然化合物（如槲皮素）对脱颗粒的抑制作用。

炎症与信号传导：

探索TLR或GPCR激动剂对肥大细胞活化的调控。

结合CRISPR技术敲除关键基因（如Syk、Lyn），验证其在信号级联中的作用。

毒理学：

用于纳米材料或环境毒素对免疫细胞激活的毒性评估。

3. 培养与实验要点

培养条件：

培养基：MEM（最低必需培养基） + 15% FBS + 1%非必需氨基酸（NEAA）。

注意事项：

细胞贴壁疏松，需轻柔吹打（建议使用细胞刮或低浓度胰酶）。

传代比例1:3至1:5，避免过度融合（影响脱颗粒功能）。

功能实验：

脱颗粒检测：用IgE/DNP刺激后，测定β-氨基己糖苷酶释放率（显色法）。

钙流检测：Fluo-4 AM标记后，实时监测FcεRI激活引起的钙离子内流。

4. 注意事项

质量控制：

定期检测支原体（如PCR法），确保无污染。

功能验证建议每10代进行一次脱颗粒效率测试。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。