F98npEGFRvIII 大鼠恶性胶质瘤细胞

F98npEGFRvIII  大鼠恶性胶质瘤细胞

 基本特性:

物种与类型：

源自 Fischer 344大鼠 胶质母细胞瘤模型，通过转染 EGFRvIII突变体（外显子2-7缺失的截短型EGFR）构建，模拟人类胶质母细胞瘤（GBM）的典型分子特征。

关键变异：

EGFRvIII组成性激活（不依赖配体的持续酪氨酸激酶活性）。

常见伴随突变：PTEN缺失（PI3K/AKT通路持续激活）。

病理特征：

高侵袭性，可穿透血脑屏障，模拟GBM的浸润性生长模式。

培养特性

形态：贴壁生长，细胞呈梭形或多极星形，伪足延伸明显。

致瘤性：大鼠颅内接种后10-14天形成明显肿瘤（MRI可监测）。

2. 核心科研应用

转化医学研究

靶向治疗开发：

测试EGFRvIII靶向疗法（如抗体偶联药物Depatux-M、小分子抑制剂奥希替尼）的敏感性及耐药机制。

联合策略：EGFR抑制剂+放疗（研究DNA损伤修复抑制）。

免疫治疗：

评估EGFRvIII-CAR-T细胞或疫苗（如rindopepimut）的疗效。

血脑屏障模型

体外共培养：与脑微血管内皮细胞（如bEnd.3）构建血脑屏障穿透实验。

体内成像：荧光素酶标记后活体成像监测肿瘤浸润动态。

3. 标准化操作体系

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 2 mM GlutaMAX + 1%丙酮酸钠。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩后终止。

接种密度：1×10? cells/cm2（避免低密度导致的异常分化）。

质控节点

分子验证：

季度检测EGFRvIII表达（Western Blot/流式）及STR分型（比对原始库）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。