J82人膀胱癌细胞

J82人膀胱癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性，69岁

组织来源:膀胱

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:EMEM+ 10% heat inactivated fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系背景与病理特征

起源：J82细胞系源自一名高分级（High-grade）膀胱尿路上皮癌（Urothelial Carcinoma）患者的肿瘤组织，属于浸润性肌层浸润性膀胱癌（MIBC）模型，具有高度恶性特征。

分子特征：

常见突变：TP53缺失（约80%病例）、PTEN失活、EGFR过表达。

标志物：表达CK7、CK20（部分）等上皮标志物，适合研究上皮-间质转化（EMT）。

耐药性：对顺铂等化疗药物易产生耐药性，常用于耐药机制研究。

2. 核心研究应用

肿瘤侵袭与转移机制：

用于研究EMT过程（如E-cadherin下调、N-cadherin上调）及转移相关基因（MMP-2/9）。

药物开发与筛选：

测试免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抗体）的敏感性。

评估靶向药物（如EGFR抑制剂厄洛替尼）的疗效。

分子病理学：

通过CRISPR技术验证TP53或RB1基因在膀胱癌进展中的作用。

3. 培养条件与实验要点

培养基：EMEM（Eagle's MEM）或DMEM，补充10% FBS + 1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养参数：

贴壁生长，传代比例1:3至1:5（胰酶消化时间≤3分钟）。

细胞形态：多边形，贴壁紧密，汇合度达80%时需传代。

冻存与复苏：

冻存液：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。

复苏后需24小时稳定贴壁，避免频繁扰动。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。