Ca Ski人子宫癌细胞

Ca Ski人子宫癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:44 岁，女性

组织来源:子宫

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% Foetal Bovine Serum (FBS).

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞来源与背景

组织来源：Ca Ski细胞系于1970年从一名43岁白人女性的转移性宫颈鳞癌（淋巴结转移）中分离建立。

HPV关联：

HPV基因组整合：Ca Ski细胞含有HPV-16和HPV-18的基因组整合（约600个HPV-16拷贝/细胞和少数HPV-18拷贝）。

致癌机制：HPV E6/E7癌蛋白通过抑制p53和pRb通路，促进细胞无限增殖和恶性转化。

病理特征：宫颈鳞癌（占宫颈癌的70-80%），高侵袭性。

2. 细胞特性

形态：贴壁生长，呈上皮样多边形，聚集成片，核大且不规则。

分子标志：

HPV标志：E6/E7 mRNA高表达（可通过qPCR检测）。

肿瘤标志物：细胞角蛋白（CK）、p16INK4a（HPV相关宫颈癌的常用标志）。

阴性表达：雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）。

遗传特征：

染色体非整倍体，常见3号、5号染色体扩增。

TP53基因通常因E6蛋白降解而功能缺失。

3. 研究应用

HPV致癌机制：研究E6/E7如何调控宿主细胞周期、凋亡和免疫逃逸。

药物筛选：测试顺铂、紫杉醇等化疗药物，或靶向HPV的疗法（如mRNA疫苗、CRISPR靶向E6/E7）。

免疫治疗：评估PD-1/PD-L1抑制剂效果（宫颈癌常高表达PD-L1）。

转移机制：研究上皮-间质转化（EMT）和侵袭相关基因（如MMP-9、N-cadherin）。

4. 培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素/链霉素。

培养参数：37°C、5% CO，传代比例1:3至1:5（胰酶消化）。

注意事项：

贴壁较牢，消化时建议用0.25%胰酶+EDTA（2-5分钟）。

定期检测HPV基因稳定性（避免长期培养后丢失）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。