NCIH1105 人小细胞肺癌细胞

NCIH1105  人小细胞肺癌细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:悬浮生长

细胞形态:漂浮的团

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM/F12 + 0.005 mg/ml Insulin + 0.01g/ml Transferrin+30nM Sodium selenite + 10 nM Hydrocortisone + 10 nM beta-estradiol + extra 2mM L-glutamine + 5% fetal bovine serum + 10% 

一、细胞基本信息

类型：人小细胞肺癌贴壁细胞，规格通常为1×10 cells/T25培养瓶。

用途：仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途，购买需取得有效资质。

二、细胞接收与处理

运输与接收：细胞以密封培养瓶形式运输，内含完全培养液。收到后，用75%酒精喷洒消毒培养瓶，置于超净台内，严格无菌操作。

静置与观察：将培养瓶放入37℃、5% CO培养箱静置2-4小时，镜下观察细胞汇合度：

汇合度＜80%：收集瓶中完全培养液至离心管，向培养瓶内加入6ml完全培养基，继续培养。

汇合度≥80%：需进行传代或冻存（操作见下文）。

注意：若为密封培养瓶，放入培养箱前需拧松瓶盖，避免气体膨胀。

三、细胞培养步骤

（一）复苏细胞

将含1mL细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混匀。

将细胞悬液转入培养瓶（或6cm培养皿），培养过夜后换液并检查细胞密度。

（二）细胞传代（贴壁细胞）

当细胞密度达80%-90%时，弃去培养液，加入1-2ml消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA），37℃培养箱消化1-2分钟。

镜下观察细胞大部分变圆脱落后，加入5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化，轻敲培养瓶使细胞脱落。

收集细胞悬液，1000RPM离心8-10分钟，弃上清，补加1-2mL培养液吹匀。

按1:2比例将细胞悬液分到新培养瓶中，每瓶补加5-6ml培养液，继续培养。

（三）细胞冻存

细胞生长至80%汇合度时，弃培养液，用PBS清洗1次。

加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，镜下观察细胞回缩变圆后，加完全培养液终止消化，吹打细胞并转移至15ml离心管，1000rpm离心5分钟。

用适量冻存液重悬细胞，转入冻存管，先置于-20℃ 1.5小时，再移至-80℃长期保存（无血清冻存液方法需参考特定货号说明）。

公司出售的产品：

注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。