NCIH716人直肠癌细胞

NCIH716人直肠癌细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:33岁，白人男性

组织来源:直肠

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞基本信息

来源：NCI-H716细胞是从人直肠腺癌组织中分离并建立的细胞系，最初由美国国立癌症研究所（NCI）收集并命名。

特性：

属于腺癌细胞，具有上皮样形态，可能表达黏液相关标志物（如MUC2）。

部分研究显示其具有分泌功能，可能产生黏液蛋白。

细胞可能携带特定的基因突变（如APC、KRAS等），需根据具体文献确认。

应用：常用于直肠癌的生物学研究、药物敏感性测试及机制探索。

2. 细胞培养要点

培养基：通常使用含10%胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培养基，需添加青霉素/链霉素（1%）。

条件：37°C、5% CO、饱和湿度。

注意事项：

细胞贴壁生长，但部分研究可能显示其具有半悬浮特性（需根据具体实验观察）。

传代时建议使用胰蛋白酶-EDTA（0.25%）消化，时间控制在2-3分钟，避免过度消化。

细胞对密度敏感，过低密度可能导致生长缓慢，建议接种密度为1×10 cells/mL。

3. 科研应用场景

肿瘤机制研究：

用于研究直肠癌的侵袭、转移能力（如通过3D培养模型模拟肿瘤微环境）。

分析信号通路（如Wnt、PI3K/AKT）在直肠癌中的作用。

药物筛选：

测试化疗药物（如5-FU、奥沙利铂）对直肠癌的敏感性。

评估靶向药物（如针对EGFR、VEGFR的抑制剂）的疗效。

基础研究：

研究细胞周期调控、凋亡通路及耐药机制。

作为基因编辑（如CRISPR/Cas9）的载体细胞，用于敲除或过表达特定基因。

4. 潜在问题与解决方案

生长缓慢或形态异常：

可能原因：血清质量差、培养基pH波动、支原体污染。

解决方案：更换新鲜血清，检测并清除支原体（如用Plasmocin处理），调整培养基pH至7.2-7.4。

传代后不贴壁或死亡：

可能原因：胰蛋白酶消化过度、细胞密度过低、培养基成分不适。

解决方案：缩短消化时间，提高接种密度，尝试添加非必需氨基酸或胰岛素等添加剂。

公司出售的产品：

注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。