BCL2 Jurkat儿童急性T淋巴细胞白血病细胞

BCL2 Jurkat儿童急性T淋巴细胞白血病细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，14岁

组织来源:外周血

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS) + 200 mcg/mL G418 + 1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:维持培养细胞浓度在1 × 105~1 × 106个活细胞/mL之间, 2-3天传1代

1. 细胞背景

Jurkat细胞：源自一名6岁儿童急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者的外周血，是研究T细胞白血病和免疫调节的经典模型。

BCL-2过表达：通过基因工程使Jurkat细胞高表达抗凋亡蛋白BCL-2，用于研究：

凋亡逃逸机制（如化疗耐药）；

BCL-2抑制剂（如Venetoclax）的敏感性；

肿瘤细胞存活与微环境互作。

2. 关键特征与用途

分子标志物：

T细胞标志：CD3、CD4、CD45（流式验证）。

BCL-2高表达：Western blot或免疫荧光确认。

凋亡相关蛋白：可能伴随MCL-1、BCL-XL表达变化。

研究应用：

化疗药物（如阿霉素）或靶向药（Venetoclax）的耐药性研究；

联合治疗策略（如BCL-2抑制剂+PI3K抑制剂）；

凋亡信号通路（如BAX/BAK激活）机制解析。

3. 培养条件

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗。

特殊要求：

悬浮生长，无需胰酶消化，直接离心传代；

建议密度维持0.5-1×10 cells/mL，避免过度拥挤；

BCL-2过表达细胞可能生长略慢，需定期检测表达稳定性。

冻存：90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。

4. 实验设计提示

凋亡检测：

Annexin V/PI双染：流式检测早期/晚期凋亡；

Caspase-3活性：荧光底物或Western blot。

功能实验：

药物处理：梯度浓度Venetoclax（0-1 μM）处理24-48小时；

siRNA敲低：靶向BCL-2或其他互作基因（如NOXA）。

公司出售的产品：

注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。