LNCaP C42B人前列腺癌细胞

LNCaP C42B人前列腺癌细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，50岁

组织来源:前列腺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM/F12(4:1) + 10% h.i. fetal bovine serum (FBS) + 0.100 μg/mL Insulin + 275 ng/mL Triiodothyronine + 88.6 ng/m Lapo-Transferrin + 4.9ng/mL d–Biotin + 251.8 ng/mL Adenine37

一、细胞系背景与特性

1. 来源与谱系

LNCaP C4-2B 是LNCaP细胞的亚系，通过骨转移灶异种移植模型筛选获得，模拟去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的临床特征。

关键特性：

雄激素受体（AR）阳性：保留AR信号通路，但对雄激素依赖性降低；

骨转移倾向：高表达骨基质黏附分子（如整合素αvβ3）；

PSA分泌：维持前列腺特异性抗原（PSA）表达，可用于疗效监测。

2. 分子特征

遗传变异：

AR扩增/突变（如T878A突变，导致抗雄激素药物耐药）；

PTEN缺失（激活PI3K/AKT通路）；

ERG基因融合（TMPRSS2-ERG，约50%前列腺癌常见）。

表观遗传：DNA甲基化异常（如GSTP1启动子高甲基化）。

二、研究应用方向

1. 疾病机制

CRPC进展：研究AR信号通路逃逸机制（如糖皮质激素受体代偿激活）；

骨转移模拟：通过共培养系统研究肿瘤-成骨细胞相互作用（如RANKL/OPG通路）。

2. 治疗开发

靶向治疗：

AR拮抗剂（恩扎卢胺、阿帕他胺）耐药性研究；

PI3K/mTOR抑制剂（如依维莫司）联合用药策略。

放射性核素疗法：PSMA靶向镥-177（1Lu-PSMA）的敏感性测试。

3. 生物标志物

液体活检模型：通过外泌体检测AR-V7剪接变体（CRPC耐药标志）。

三、培养与实验技术要点

1. 培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%青霉素/链霉素；

传代：0.25%胰酶消化，每周2-3次（80%汇合时）；

冻存：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。

2. 实验模型

体内模型：胫骨或股骨注射构建骨转移PDX模型；

类器官：3D培养模拟肿瘤微环境异质性。

四、局限性及前沿进展

1. 挑战

遗传漂变风险：长期传代可能导致AR信号通路改变，需定期STR鉴定；

微环境简化：单层培养无法完全模拟骨转移生态位。

公司出售的产品：

注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。