Caki1人肾细胞癌细胞

                                                                             Caki1人肾细胞癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:49 岁，男性

组织来源:肾透明细胞癌皮肤转移

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:

培养条件:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管IMDM+ 10% heat inactivated fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基本信息

名称：Caki1

来源：人透明细胞肾细胞癌（Clear Cell Renal Cell Carcinoma, ccRCC）细胞系，分离自一名65岁男性肾透明细胞癌患者的转移性腹膜后淋巴结肿瘤组织。Caki1是肾癌研究中常用的细胞模型，具有透明细胞肾癌的典型特征。

特性：

组织学类型：透明细胞肾细胞癌（ccRCC），占肾癌的约70%-80%，具有VHL基因失活和HIF通路激活的特征。

基因突变谱：

常见突变：VHL基因失活（功能缺失）、PBRM1突变、SETD2突变、BAP1突变。

其他特征：可能携带TERT启动子突变、mTOR通路激活或PD-L1表达。

免疫表型：

部分Caki1细胞可能高表达PD-L1，对免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抗体）敏感。

TMB（肿瘤突变负荷）中等，可能适合免疫治疗。

功能特性：

增殖能力较强，迁移和侵袭能力中等，适合用于转移机制研究。

对靶向药物（如舒尼替尼、帕唑帕尼）敏感，但易产生耐药性。

2. 肾透明细胞癌背景与Caki1的关联

肾透明细胞癌分子分型：

ccRCC1型：VHL基因失活，HIF通路激活，代谢重编程（如糖酵解增强、脂肪酸合成增加）。

ccRCC2型：PBRM1突变，免疫微环境激活，可能对免疫治疗敏感。

ccRCC3型：SETD2突变，基因组不稳定，预后较差。

Caki1的分子亚型：

可能属于ccRCC1型，因其携带VHL基因失活和HIF通路激活的特征。

需结合基因表达谱进一步验证其是否具有ccRCC2型（免疫激活型）特征（如PD-L1高表达）。

临床相关性：

肾透明细胞癌对靶向治疗（如VEGFR抑制剂、mTOR抑制剂）初始响应率高，但易复发和耐药。

Caki1作为肾透明细胞癌细胞模型，可用于研究耐药机制、免疫治疗响应及潜在治疗靶点。

3. Caki1在科研中的应用

药物筛选与耐药研究：

靶向药物：测试舒尼替尼、帕唑帕尼（VEGFR抑制剂）、依维莫司（mTOR抑制剂）的敏感性，研究耐药机制（如VHL基因失活导致的HIF通路持续激活、mTOR通路补偿性激活、PBRM1突变导致的免疫逃逸）。

免疫检查点抑制剂：针对PD-L1高表达，如帕博利珠单抗、纳武利尤单抗。

耐药机制：

靶向耐药可能与HIF通路激活、代谢重编程或肿瘤干细胞（CSC）富集相关。

免疫逃逸可能与PD-L1表达下调、T细胞耗竭或肿瘤微环境（TME）免疫抑制相关。

分子机制研究：

VHL-HIF通路：VHL基因失活导致HIF-1α和HIF-2α稳定，激活下游基因（如VEGF、GLUT1、CA9）。

PBRM1突变：PBRM1突变影响染色质重塑，可能调控免疫相关基因表达。

代谢重编程：研究糖酵解（如HK2、PKM2高表达）、脂肪酸合成（如FASN高表达）的调控机制。

3D培养与类器官模型：

结合3D培养技术，模拟肾透明细胞癌的微环境，研究肿瘤细胞与基质细胞的相互作用。

通过类器官模型验证药物疗效，推动个性化治疗。

4. 实验注意事项

细胞培养条件：

培养基：通常使用RPMI-1640或DMEM培养基，含10%-20%胎牛血清（FBS）和抗生素（如青霉素、链霉素）。

形态特征：细胞呈上皮样，贴壁生长，增殖速度中等。

污染检测：定期检测支原体污染，避免实验误差。

基因突变验证：

通过PCR或测序确认VHL基因失活状态、PBRM1突变状态，确保细胞系身份正确。

功能实验设计：

结合HIF通路标志物免疫组化（如HIF-1α、CA9染色），验证Caki1的VHL-HIF通路激活特征。

通过Transwell实验研究肿瘤细胞侵袭能力。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。