SNU449人肝癌细胞

                                                                             SNU449人肝癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，52岁

组织来源:肝

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI-1640 + 10% h.i. fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1：4传代，1-2天传1代

1. 细胞系背景与分子特性：

基础特征

来源与分型

源自韩国患者的肝细胞癌（HCC）组织，病理确认为 中低分化，典型标志物 AFP+、GPC-3+，可能携带亚洲人群高频突变（如 TERT启动子突变、TP53失活）。

关键分子特征：

graph LR

A[驱动变异] --> B[CTNNB1突变(β-catenin激活)]

A --> C[AXIN1缺失(Wnt通路异常)]

A --> D[代谢重编程(糖酵解增强)]

临床相关性

靶向治疗模型：若存在MET扩增（约5% HCC），适合测试卡博替尼或克唑替尼。

免疫微环境：PD-L1表达需验证（影响免疫检查点抑制剂研究）。

2. 核心科研应用：

转化研究方向

耐药机制：

研究索拉非尼耐药中FGF19/FGFR4通路激活及旁路信号补偿。

测试新型药物组合（如仑伐替尼+PD-1抑制剂）。

代谢干预：

靶向HK2（己糖激酶2）或LDHA（乳酸脱氢酶A）抑制糖酵解。

前沿模型构建

类器官-免疫共培养：

与患者来源T细胞共培养，评估PD-1阻断后的肿瘤杀伤效应。

循环肿瘤细胞(CTC)模型：

通过微流控芯片从培养上清分离CTC，研究转移起始机制。

3. 培养规范与质控：

关键参数

项目  条件  优化建议

培养基  DMEM高糖 + 10% FBS  添加1%丙酮酸钠（增强代谢）

传代周期  每2-3天（快速增殖）  胶原酶IV消化（保护膜蛋白）

冻存方案  10% DMSO + 20% FBS  程序降温后液氮保存

质控重点  每月检测AFP分泌量  STR比对KCLB数据库

常见问题对策

细胞聚集：使用40μm细胞筛过滤或低浓度DNase I处理。

支原体污染：BM-Cyclin交替处理（25μg/mL，3天/轮）。

4. 替代资源与数据整合：

横向对比模型

特征  SNU-449  替代细胞系

β-catenin激活  确认CTNNB1突变  HepG2（经典Wnt通路模型）

高转移性  需验证  MHCC97-H（肺转移倾向）

免疫治疗平台  PD-L1待检测  Huh7（已建立CD8+共培养）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。