SNU354人肝癌细胞

                                                                             SNU354人肝癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:52岁，亚洲男性

组织来源:肝

生长特性:贴壁生长

细胞形态:多边形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI-1640 Medium +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系背景与分子特性：

基础特征

来源与分型

源自韩国患者的肝细胞癌（HCC）组织，属于中低分化亚型，保留典型HCC标志（AFP+、GPC-3+），可能携带亚洲人群高发突变（如 TERT启动子突变）。

关键驱动变异：

graph LR

A[高频突变] --> B[TP53(35%)]

A --> C[CTNNB1(20%)]

A --> D[AXIN1(10%)]

A --> E[TERT启动子(60%)]

特殊表型：

高分泌外泌体（含miR-21等促转移因子）

潜在血管侵犯倾向（需体内验证）

临床关联性

靶向治疗：若存在MET扩增（约5% HCC），适合卡博替尼测试

免疫治疗：PD-L1表达状态需验证（影响PD-1抑制剂研究）

2. 核心科研应用：

转化研究重点

耐药机制

研究索拉非尼耐药中FGF19/FGFR4通路激活

测试新型双免疫疗法（如纳武利尤单抗+伊匹木单抗）

前沿模型

类器官-免疫共培养

构建SNU-354类器官与自体T细胞共培养系统，模拟免疫检查点阻断微环境

循环肿瘤细胞(CTC)捕获

通过微流控芯片从培养上清分离CTC，研究血行转移机制

3. 培养规范与质控：

关键参数

项目  条件  优化建议

培养基  DMEM高糖 + 10% FBS  添加1% NEAA（改善能量代谢）

传代周期  每2-3天（增殖较快）  胶原酶IV消化替代胰酶

冻存保护  10% DMSO + 20% FBS  程序降温速率≤1℃/min

质控节点  每月检测AFP分泌水平  STR比对KCLB数据库

常见问题处理

上皮-间质转化(EMT)：添加2μM TGF-β抑制剂（Galunisertib）

支原体污染：采用BM-Cyclin交替处理（5天周期）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。