SKW3成人急性T淋巴细胞白血病细胞

                                                                             SKW3成人急性T淋巴细胞白血病细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，27岁

组织来源:淋巴

生长特性:悬浮生长

细胞形态:

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:90% RPMI 1640 + 10% h.i. FBS，37℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 基础背景与特性：

来源与分类

组织来源：源自成人急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者外周血，属于 成熟T细胞肿瘤 模型

分子特征：

标志物表达：CD3+/CD4+/CD7+（成熟T细胞表型），TCRαβ+

遗传异常：NOTCH1激活突变（约50% T-ALL病例）、PTEN缺失

功能特性：

 悬浮生长，可形成细胞聚集体

 对糖皮质激素（如地塞米松）敏感

研究价值

研究NOTCH1信号通路异常激活的经典模型

评估T细胞靶向免疫治疗（如抗CD3/CD7 CAR-T）的理想平台

2. 核心研究应用：

转化医学方向

靶向治疗：

γ-分泌酶抑制剂（阻断NOTCH1剪切，如DAPT）疗效测试

PI3K/mTOR通路抑制剂（如依维莫司）联合方案评估

免疫治疗：

CD7 CAR-T细胞杀伤效率检测（LDH释放实验）

免疫检查点分子（如PD-1/CTLA-4）表达分析

机制研究

信号通路：

NOTCH1-HES1轴动态监测（Western Blot）

糖皮质激素受体（GR）核转位观察（免疫荧光）

耐药模型：

地塞米松耐药株构建（逐步浓度递增法）

3. 培养与质控要点：

培养体系

基础培养基：RPMI-1640 + 15% FBS + 1% L-谷氨酰胺

传代处理：每3天按1:3比例稀释（维持密度0.5-2×10/mL）

冻存方案：90% FBS + 10% DMSO（程序降温至液氮）

质控标准

遗传验证：

STR鉴定

NOTCH1突变检测（Sanger测序）

功能检测：

流式验证CD3/CD7表达率（应>95%）

地塞米松敏感性测试（IC50约10-100 nM）

4. 局限性及优化策略：

局限性  解决方案

缺乏肿瘤微环境  与骨髓基质细胞或OP9-DL1共培养

NOTCH1抑制毒性大  联用低剂量GSI+化疗药

体内模型成瘤率低  改用NSG小鼠尾静脉注射

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。