SKMEL24人黑素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性：

种属来源:人

性别年龄:67岁，白人男性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:星型细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:MEM+15% fetal bovine serum+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 基础背景与特性

来源与分类

组织来源：源自人皮肤转移性黑色素瘤，属于上皮样细胞亚型

分子特征：

高频突变：BRAF V600E（典型驱动突变）、CDKN2A缺失（p16失活）

标志物表达：S100+/SOX10+（黑色素细胞分化标志），MITF中表达

功能特性：

 高转移倾向（肺转移模型建立成功率>80%）

 对BRAF抑制剂（如维莫非尼）敏感（IC50约10-50 nM）

研究价值

研究BRAF突变型黑色素瘤靶向治疗耐药机制的金标准模型

探索MITF调控的黑色素合成与肿瘤进展关联

2. 核心研究应用

转化医学方向

靶向治疗：

BRAF/MEK抑制剂联合方案（达拉非尼+曲美替尼）疗效评估

免疫检查点抑制剂（抗PD-1）敏感性测试（PD-L1表达约15-30%）

耐药机制：

MAPK通路再激活（如NRAS突变获得）

表观遗传调控（EZH2过表达介导的耐药）

机制研究

代谢重编程：

氧化磷酸化依赖（Seahorse检测OCR/ECAR比值）

铁死亡敏感性（GPX4抑制剂处理）

转移模拟：

3D侵袭实验（胶原基质中形成侵袭伪足）

循环肿瘤细胞（CTC）特性分析

特性3. 培养与质控要点

培养体系

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% NEAA

传代处理：0.25%胰酶消化2分钟（上皮样贴壁，避免过度消化）

冻存方案：90% FBS + 10% DMSO（程序降温至液氮）

质控标准

遗传验证：

STR鉴定

BRAF V600E突变ARMS-PCR验证

功能检测：

黑色素颗粒观察（显微镜下评估）

裸鼠尾静脉注射肺转移模型（4周后成像）

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