RERFLCAd2人非小细胞肺癌细胞

                                                                             RERFLCAd2人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 medium with 10% heat inactivated fetal calf serum.37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 基础背景与特性：

来源与分类

组织来源：源自日本男性非小细胞肺癌（NSCLC）患者的原发肿瘤组织，属于 肺腺癌 亚型。

分子特征：

常见突变：EGFR野生型（适合研究非EGFR依赖的肺癌机制）、KRAS G12C/V（约30% NSCLC相关）

标志物表达：TTF-1+/Napsin A+（腺癌特征），PD-L1表达中等（20-40%）

功能特性：

 中等侵袭性（Transwell迁移能力显著）

 对铂类化疗（顺铂）敏感，可建立耐药模型

研究价值

亚洲人群肺癌研究的代表性模型（与欧美细胞系互补）

适合探索KRAS突变型肺癌的靶向治疗策略

2. 核心研究应用：

转化医学方向

靶向治疗：

KRAS G12C抑制剂（如Sotorasib）疗效评估

抗血管生成药物（贝伐珠单抗）联合化疗测试

免疫治疗：

PD-1/PD-L1阻断剂（如纳武利尤单抗）敏感性分析

肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）互作研究

机制研究

EMT调控：E-cadherin/N-cadherin动态转化

代谢异常：

谷氨酰胺代谢依赖（谷氨酰胺酶抑制剂CB-839处理）

糖酵解活性检测（Seahorse能量代谢分析）

3. 培养与质控要点：

培养体系

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% NEAA

传代处理：0.25%胰酶消化3分钟（贴壁较紧，需轻柔吹打）

冻存方案：90% FBS + 10% DMSO（程序降温至液氮）

质控标准

遗传验证：

STR鉴定

KRAS突变Sanger测序（引物参考NCBI NM_033360）

功能检测：

3D培养成球能力（Matrigel基质胶）

皮下成瘤实验（裸鼠模型，4-6周潜伏期）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。