NCIH720 [H720]人小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性：

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:悬浮生长

细胞形态:圆形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F12+0.005 mg/mL Insulin0.01 mg/mL Transferrin30nM Sodium selenite (final conc.)10 nM Hydrocortisone (final conc.)10 nM beta-estradiol (final conc.)extra 2mM L-glutamine (fo⳰

1. 核心生物学特性

病理与分子特征

组织来源：源自SCLC患者淋巴结转移灶，属 经典神经内分泌亚型（ASCL1+/NEUROD1-）

关键标志物：

神经内分泌标记：Synaptophysin（+++）、CD56（NCAM1+）、嗜铬粒蛋白A（局灶+）

基因组特征：

高频突变：TP53（R273H）、RB1（exon13缺失）

特殊变异：BCL2基因扩增（拷贝数≥7）与PTEN低表达

功能特性：

高表达DLL3（Delta-like ligand 3，流式MFI≥5×103）

分泌IL-6（＞600pg/mL）诱导STAT3持续激活

2. 核心研究价值

转化医学应用

靶向治疗模型：

BCL2抑制剂（Venetoclax）敏感性测试（IC50 10-15nM）

DLL3靶向双抗（如Tarlatamab）的耐药机制研究

免疫微环境：

与Treg细胞共培养诱导PD-1/CTLA-4双阳性耗竭表型

适用于CD47/PD-L1双阻断策略评估

技术适配性

单细胞分析：已优化scRNA-seq流程（需预选CD56+/DLL3+细胞）

类器官培养：3D悬浮形成致密球体（直径60-100μm），需添加10μM Y-27632

3. 培养体系优化

定制化培养条件

基础培养基：

 RPMI-1640 + 15% 热灭活FBS + 1% NEAA

关键添加物：

- 2-巯基乙醇（0.1mM）

- 重组人EGF（20ng/mL）

- B27补充剂（1:50）

特殊处理：

 悬浮培养需使用超低吸附培养瓶

 每48小时补充L-谷氨酰胺（2mM）

质控标准

检测项  方法  合格标准

神经内分泌特性  三标流式（Syn/CD56/CgA）  阳性率≥90%

BCL2扩增稳定性  FISH（BCL2/CEP18）  信号比≥6.0

支原体污染  MycoAlert PLUS  RLU值＜临界值

4. 常见问题解决方案

问题：细胞团块化严重

→ 优化：添加DNase I（5μg/mL）消化，37℃振荡10分钟

问题：DLL3表达下调

→ 处理：复苏后预刺激（Notch抑制剂DAPT 10μM，24h）

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