NCIH460人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 核心生物学特性

分子病理特征

组织来源：源自大细胞肺癌患者胸水转移灶，病理分型为 经典大细胞癌（LCC），缺乏腺/鳞癌分化标记

驱动变异：

KRAS Q61H突变（占比＞95%），伴STK11/LKB1缺失（导致代谢重编程）

独特标记：高表达NANOG（干细胞因子）和CDCP1（转移相关蛋白）

功能特性：

线粒体呼吸链活性异常（对二甲双胍敏感）

分泌IL-6（＞1000pg/mL/10 cells）诱导STAT3持续激活

2. 研究应用方向

转化医学价值

靶向治疗模型：

KRAS Q61H抑制剂（如MRTX1133）的敏感性测试（IC50 50-100nM）

代谢干预研究：谷氨酰胺酶抑制剂（CB-839）与化疗联用评估

转移机制：

体外血行转移模型构建（Transwell穿透率＞30%）

适合研究CDCP1介导的腹膜转移机制

技术适配性

单细胞多组学：已建立scRNA-seq+代谢流分析联合流程

类器官培养：需添加10% Matrigel + 5% 条件培养基形成实性球体

3. 培养体系优化

定制化培养方案

基础培养基：

 RPMI-1640 + 10% 透析型FBS（减少生长因子干扰）

关键添加物：

- 丙酮酸钠（1mM）

- 二甲双胍（2mM，抑制mTOR）

- Y-27632（5μM，防凋亡）

特殊条件：

 需5% CO + 3% O低氧环境

 传代时机械刮取优先于胰酶消化

质控标准

检测项  方法  合格阈值

KRAS突变稳定性  ARMS-PCR（Q61H）  突变频率≥90%

支原体污染  MycoSEQ NGS检测  读数＜50 RPM

细胞侵袭性  3D胶原侵袭实验  侵袭深度＞80μm/48h

4. 常见问题解决方案

问题：细胞贴壁性差

→ 优化：改用纤维连接蛋白（10μg/mL）包被，缩短消化时间至3分钟

问题：代谢分析数据波动

→ 控制：统一培养时间（对数生长期24h取样），避免接触塑料耗材释放物

公司正在出售的产品：