NCIH441人非小细胞肺癌细胞

NCIH441人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

细胞特性：

组织来源：肺腺癌（Ⅱ期）患者原发灶

病理特征：

腺泡为主型（TTF-1++/Napsin A+）

保留部分Ⅱ型肺泡上皮分化特征

认证信息：

ATCC编号：HTB-174

STR分型匹配率≥95%（需每6个月验证）

分子特征谱：

1. 关键驱动变异

基因  变异类型  临床意义

KRAS  G12V突变  组成性激活MAPK通路

TP53  R158L（DNA结合域）  部分功能缺失

NKX2-1  扩增（FISH≥4 copies）  维持肺泡上皮分化

PD-L1  22C3 TPS=10%  免疫治疗潜在响应

2. 特殊功能标记

flowchart LR

A[肺泡上皮特性] --> B[Lamellar bodies]

C[Clara细胞特征] --> D[CCSP分泌]

E[药物代谢] --> F[CYP450酶活性]

培养标准化方案：

优化培养体系

参数  标准方案  气液界面培养方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  DMEM/F12 + 2% Ultroser G

关键添加剂  1% ITS+Premix  50nM地塞米松 + 0.1mM cAMP

传代方法  0.25%胰酶+0.1% EDTA  Transwell渗透膜培养

冻存密度  2×10 cells/mL  类器官冻存试剂盒

 质控要点

形态监控：

正常：立方形上皮样（异常扁平提示去分化）

处理：添加10nM地塞米松维持分化状态

功能验证：

定期检测CCSP分泌（ELISA法）

电镜观察板层小体（Lamellar bodies）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。