NCIH2444人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性，未知

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3-1:4传代, 2-3天传1代

1. 核心生物学特性

分子病理特征

组织来源：源自肺腺癌患者的原发肿瘤组织，病理分型为 实体型腺癌伴肉瘤样分化（含上皮-间质双向标记）

驱动变异：

ALK融合阳性（EML4-ALK variant 3a），伴TP53 R249S共突变

独特基因型：CDKN2A/B缺失（导致细胞周期调控异常）

功能特性：

高表达PD-L1（TPS 40-60%）和CXCL12（SDF-1）

干细胞特性：CD44+ALDH1A1+亚群占比10-15%

2. 核心研究价值

转化医学应用

靶向治疗模型：

ALK抑制剂（如洛拉替尼）敏感性测试（IC50 1-3nM）

耐药机制：可诱导ALK G1202R或EGFR旁路激活

免疫微环境研究：

与癌症相关成纤维细胞（CAFs）共培养促进CXCL12分泌

适用于抗PD-1/抗CXCR4联合治疗评估

技术适配性

单细胞分析：已建立scRNA-seq追踪ALK融合克隆演化

类器官培养：3D Matrigel中形成实性球体（需添加10μM Y-27632）

3. 培养体系优化

定制化培养方案

基础培养基：

 DMEM/F12 (3:1) + 10% 特级胎牛血清（需预筛选支持ALK信号）

关键添加物：

- 重组人EGF（10ng/mL）

- 胰岛素（5μg/mL）

- A83-01（1μM，抑制自发分化）

特殊条件：

 传代时保留条件培养基（比例1:1）

 建议使用胶原IV包被培养瓶

质控标准

检测项  方法  合格阈值

ALK融合稳定性  RT-ddPCR（V3a）  融合转录本≥85%

支原体污染  PCR-电泳双验证  条带阴性

细胞活力  Calcein-AM/PI双染  存活率＞90%

4. 常见问题解决方案

问题：洛拉替尼敏感性下降

→ 优化：冻存早期代次（P10前），避免长期培养导致遗传漂变

问题：类器官形成率低

→ 调整：Matrigel浓度提升至70%，补充FGF2（25ng/mL）

公司正在出售的产品：