NCIH2405人非小细胞肺癌细胞

NCIH2405人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:47岁，白人男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +5% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

细胞特性：

组织来源：肺肉瘤样癌（Sarcomatoid carcinoma）患者原发灶（ⅢA期）

病理特征：

双向分化（上皮样+梭形细胞成分）

免疫组化：TTF-1±/P40+/Vimentin+++

认证信息：

STR分型匹配JCRB 0214标准（需每6个月验证）

支原体检测：每月MycoAlert（阈值RLU≤1.0）

分子特征谱：

1. 关键驱动变异

基因  变异类型  临床意义

MET  Exon14跳跃突变  对克唑替尼敏感（IC50=28nM）

TP53  R273C（DNA结合域）  促基因组不稳定

CDKN2A  纯合缺失  细胞周期失控

PD-L1  22C3 TPS=40%  免疫治疗高响应潜力

2. 蛋白表达特征

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复制

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title 免疫组化标记

"Vimentin" : 95

"P40" : 80

"TTF-1" : 30

"PD-L1" : 40

培养标准化方案：

优化培养体系

参数  标准方案  3D培养方案

基础培养基  DMEM高糖 + 15% FBS  Matrigel（30%）+ 2% BME

关键添加剂  1% NEAA + 10mM HEPES  10ng/mL HGF + 5ng/mL EGF

传代方法  胶原酶IV（2mg/mL, 15min）  机械解离法

冻存密度  3×10 cells/vial  类器官冻存试剂盒

 质控要点

形态监控：

上皮样（多边形）与梭形细胞混合（比例需维持1:1）

异常纯梭形化提示EMT完成（需重新克隆筛选）

支原体防控：

预防性使用Plasmocin（5μg/mL, 每3代）

PCR检测（引物：5'-ACTCCTACGGGAGGCAGC-3'）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。